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酶法生产生物活性肽不仅有利于充分利用蛋白质资源,而且具有广阔的膳食或药物的应用前景,其中利用大豆蛋白生产降血压肽因其安全、高效性而受到了广泛关注。考虑到疏水性氨基酸对多肽的ACE抑制活性的重要作用,论文研究利用大豆分离蛋白（SPI）的一次水解沉淀,即高分子蛋白片段（high-molecular-weight fraction HMF）制备ACE抑制肽并对具有高活性的组分进行了分离纯化和结构鉴定。论文首先对酶解HMF的条件进行优化研究。结果表明,微波预处理比加热辅助处理更有助于促进HMF水解,且确定最适微波功率为200W,时间为30s。选用Protease N作为适合水解HMF的蛋白酶,其生产ACE抑制肽的最佳水解条件是:底物浓度5%（w/v）,加酶量2%（w/w）,温度55℃,pH值7.0,水解时间120min。在以上的水解条件下HMF的酶解液的ACE抑制活性最高,达到65.1%。同时,研究表明HMF具有较SPI更高含量的疏水性氨基酸和疏水性值。采用截留相对分子质量为5000的膜将粗水解液经过超滤分离,收集流出液,水解物的IC50降低了15.5%,达到了初步纯化的目的。采用DA201-C型大孔吸附树脂能有效脱去HMF水解液中的盐分,同时使用不同浓度的乙醇分级分离,发现高浓度的乙醇对洗脱组分的疏水性氨基酸有富集和分级作用,75%乙醇浓度洗脱下来的组分具有最高的降血压活性,IC50达到0.093 mg·mL-1。经体外消化实验发现,消化道酶作用后ACE抑制活性基本不变。说明经以上步骤制得的ACE抑制肽能较好地抵抗消化道酶作用。采用Sephadex G-15分离75%乙醇洗脱下来的组分,酸性洗脱液:0.2mol·L-1、PH=3.6的醋酸—醋酸钠缓冲液具有较好的分离效果,收集得到ACE抑制活性最高的两个组分,IC50分别为41μg·mL-1和43μg·mL-1组分。其中一个组分经半制备RP-HPLC分离,得到具有最高ACE抑制活性的组分P6-Ⅳ,结合液质联用,分析其一级结构,其氨基酸序列可能是Ser-Trp,IC50值为41.1μmol·L-1。另一组分采用LC/ESI-MS对它的成分进行鉴定,推测其中主要两个组分为大豆异黄酮的化合物,可能分别是6”-丙二酰基异黄酮糖甙和6”-丙二酰基染料木甙或它们的异构体。