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目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂Roscovitine及其衍生物对EV71病毒的抑制作用并期望获得比原药活性更好、毒性更低的抗肿瘤药物。 方法:1.在EV71病毒感染的7日龄ICR乳鼠模型上,通过存活率和平均日增重结果初步评价Roscovitine及其衍生物体内抗EV71病毒结果。实验结束,取肺、脑、肠、肌肉组织,分别通过 RT-PCR检测组织中病毒 RNA含量;western印记技术检测Roscovitine对EV71病毒的VP1蛋白的抑制作用;病理切片HE染色检测Roscovitine对小鼠病毒感染导致的组织损伤的保护作用。2.采用CCK8法检测12种Roscovitine衍生对7种肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术检测衍生物对 HepG2、A549和MCF-7细胞周期和凋亡的影响;激酶活性实验检测衍生物对细胞周期蛋白激酶CDK的影响;体内实验检测衍生物对人乳腺癌细胞MCF-7裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。 结果:1. Roscovitine及其衍生物5、25、26、27、48、49、52、53可显著提高EV71病毒感染小鼠的存活率,改善EV71病毒感染所致的小鼠体重增长缓慢;与病毒感染对照组相比,Roscovitine的4mg/kg/d处理组能显著降低EV71病毒感染小鼠肺、脑、肠、肌肉组织中病毒 mRNA含量,降低 EV71病毒感染小鼠肺、脑和肌肉组织中病毒 VP1蛋白的表达,显著改善病毒感染小鼠所致的肺、脑和肌肉组织的病理损伤。2. Roscovitine衍生物4、26、27、52、53的治疗指数TI值大于Roscovitine;与肿瘤细胞对照组相比,衍生物26、27、52、53显著提高肿瘤细胞(HepG2、A549和MCF-7)的凋亡率,显著升高S期和G2M期细胞比例,导致肿瘤细胞明显停滞在S期或G2M期;与Roscovitine阳性对照组相比,衍生物26、27、52、53对肿瘤细胞(HepG2、A549和MCF-7)的凋亡和周期的影响不明显;与Roscovitine相比,衍生物52、53对CDK1/cyclin B激酶的活性抑制作用与其接近,衍生物26、27的活性抑制作用稍差;与模型对照组相比,衍生物26和52可显著提高体内对裸鼠人乳腺癌细胞MCF-7皮下移植瘤生长的抑制作用;与 Roscovitine对照组相比,衍生物26对对肿瘤生长的抑制作用与其相当,衍生物52对肿瘤生长的抑制作用比其稍差。 结论:Roscovitine及其衍生物5、25、26、27、48、49、52、53有抗EV71病毒的活性。Roscovitine衍生物26和52抗肿瘤活性优于或接近其先导化合物Roscovitine。