神经肽P物质对小鼠毛囊周期影响的研究

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目的:通过皮下注射神经肽P物质(SP),观察SP对C57BL/6小鼠毛囊周期的影响,探讨SP在脱发中的作用及可能的机制。方法:选用雌性C57BL/6小鼠用松蜡合剂的方法将小鼠脱毛,随机将脱毛后的小鼠分为正常组、10-6SP组和10-5SP组,对应的在各组小鼠颈背部皮下注射PBS溶液、10-5mol/L和10-6/mol/L的SP溶液,分别于注射后的第1、5、9、19天时观察注射区域的皮肤颜色变化情况;同时选取第9、19天为时间点,测定该时间段注射部位的灰度值,并在该时间点时取小鼠注射部位的皮肤组织,HE染色下观察各时间点毛囊的组织学形态变化、并计数该时期的毛囊个数、甲苯胺蓝染色法观察该时间段肥大细胞释放脱颗粒的情况、免疫组织化学法检测CK19和Nestin在此时段组织切片中特定部位的表达情况。结果:1.处理部位的皮肤颜色变化:通过灰度值测定,注射后第9天,对照组小鼠注射部位为黑色,10-6SP组为深灰色,10-5SP组为浅灰色;注射后第19天,对照组小鼠注射部位为粉色,10-6SP组为浅灰色,10-5SP组为深灰色;2.HE染色横切片中各组毛囊个数比较:注射后第9天,与对照组相比较,10-6SP组SP和10-5SP组中毛囊个数减少,其差别有统计学意义(P<0.05);脱毛后第19天,与对照组相比,10-6SP组和10-5SP组中毛囊个数增加,其差别有统计学意义(P<0.05);且毛囊形态学显示注射后第9天,对照组中注射部位毛囊呈生长晚期表现,10-6SP组中呈生长中期,10-5SP组中为生长早期;注射后第19天,对照组、10-6SP组、10-5SP组中注射部位的毛囊分别处于静止期,退行期和生长晚期。3.注射后第9天和第19天,对照组中可见淡紫色呈团块状的肥大细胞,局部几乎未发生脱颗粒现象;在10-5SP组和10-6SP组中,在部分肥大细胞的局部可见到脱颗粒的现象。注射后第9天,与对照组相比,10-5SP组和10-6SP组中的MC脱颗粒数增多,其差别有统计学意义(P<0.05);注射后第19天,10-5SP组和10-6SP组中肥大细胞脱颗粒数比对照组中MC脱颗粒显著增加,具有统计学意义(P<0.05);且注射后的第9天和第19天,10-5SP组比10-6SP组中MC脱颗粒数显著增加。4.免疫组化表达情况:注射后第9天和19天,在对照组、10-6SP组、10-5SP组中的毛囊外根鞘、部分汗腺以及基底层中都可见CK19阳性细胞,且各组组织中CK19在隆突区和外根鞘的阳性表达情况无明显差别,无统计学意义(P>0.05);在各组皮肤组织中的表皮、皮脂腺、部分汗腺以及毛囊隆突区和毛囊内外根鞘中都可见到Nestin阳性细胞,其在隆突区和外根鞘中的阳性表达率无统计学意义(P>0.05);第19天时,CK19和Nestin的阳性细胞出现的位置与第9天相同,各组的CK19和Nestin阳性表达率均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.皮下注射SP溶液后可影响小鼠毛囊周期的正常进展,表现为减慢生长期毛囊的生长。2.SP可使毛囊周围的肥大细胞产生脱颗粒现象,且与SP浓度相关;3.SP和肥大细胞所组成的SP-MC通路可能参与小鼠毛囊周期的调节。4.SP对CK19和Nestin这两种毛囊干细胞标记物的表达没有影响。
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