采后果实的软化速度是影响保质期与货架寿命的关键，搞清楚其内部调控机制是创建采后保鲜新途径的基础和依据。脂氧合酶（LOX）不仅在果实质地软化和成熟衰老过程中扮演着重要角色，其参与合成的茉莉酸（JA）也与乙烯和果实的成熟衰老有关。近年来，已经有越来越多的研究围绕其展开。柿和苹果均属呼吸跃变型果实，在消费市场上深受广大消费者的喜爱，目前尚未见到柿果实LOX基因序列的报道，在这两种果实上也没有LOX基因家族成员的系统研究。本论文以‘富平尖柿’和‘金冠’的果实为材料，围绕LOX与它们成熟衰老的关系进行研究，主要结果如下：1.运用RACE技术，从柿果实成功克隆到两个LOX基因的cDNA序列，DkLOX1（基因登录号为JF436951）和DkLOX3（基因登录号为JF436950），系统进化树分析表明它们均属9-LOX型。构建了一个原核表达载体pET-DkLOX1，SDS-PAGE凝胶电泳后，该载体表达出1条接近118kDa的特异蛋白条带。2.用60mg L–1的GA3溶液和50mg L–1的ABA溶液处理采后柿果实，常温（20~24℃）贮藏期间定期取样进行相关生理指标的测定，结果表明，与对照相比，GA3处理使果实保持了较高的硬度，较低的丙二醛（MDA）含量，乙烯释放高峰值和LOX活性降低，减缓了果实的成熟软化与衰老进程；而ABA处理则促进果实硬度下降和MDA含量上升，乙烯释放高峰和LOX活性高峰均被提前了3d，加速了这一进程。3.运用实时荧光定量PCR（QPCR）技术检测柿果实在GA3和ABA处理后常温（20~24℃）贮藏期间DkLOX1和DkLOX3表达水平的变化，结果表明，DkLOX1和DkLOX3的表达变化趋势与LOX活性以及乙烯释放量的变化趋势一致。具体表现为，GA3处理使DkLOX1和DkLOX3的表达水平降低，二者的表达高峰时间均与对照一致，出现在采后贮藏第15d；而ABA处理后这两个基因的表达均被上调，表达高峰提前了3d，其中DkLOX3对这两种处理反应更为敏感。4.以‘金冠’果实为试材，在商业采收前12周（07/17到10/02）进行相关生理指标的测定，发现果实硬度不断下降，直径不断上升，淀粉指数（SPI）在后期明显上升，内源乙烯仅在最后几周被明显检测到且浓度很低。运用常规PCR和QPCR技术对这期间果实中表达的13-LOX家族成员及其他与JA合成途径相关的基因进行筛选，确定了在果肉（含果皮）和果心中表达的13个基因，包括：4个LOX（MdLOX22、MdLOX23、MdLOX28和MdLOX39），3个AOS（MdAOS2、MdAOS3和MdAOS5），2个AOC（MdAOC2和MdAOC5），2个JMT（MdJMT2和MdJMT5）以及2个ERF（MdERF1和MdERF2）。5.以商业采收前12周的‘金冠’果实为试材，运用QPCR技术对上述13个基因以及乙烯合成酶基因MdACS3的表达模式进行检测，发现它们的转录本在果肉（含果皮）中呈现4种变化模式：Ⅰ“前期高”，有3个，包括：MdLOX28、MdAOC2和MdAOC5；Ⅱ“后期高”，一共7个，这些基因是：MdLOX22、MdLOX23、MdAOS2、MdERF1、MdERF2、MdJMT2和MdACS3；Ⅲ：“整体变化不明显”，有2个，包括：MdAOS3和MdJMT5；Ⅳ“一直下降”，有2个，它们是：MdLOX39与MdAOS5。MdLOX23和MdAOS2在果肉（含果皮）和果心部位有一致的表达趋势，表达量都在10/02显著增加。6.对商业采收前SPI达1.2、1.9和3.5的‘金冠’果实进行MeJA溶液喷洒处理，定期采样进行相关生理指标的测定，结果表明，除了极个别采样点外，处理果和对照果之间的硬度和SPI整体差异不明显，但对内源乙烯的产生有影响，表现为：在SPI=1.2处理的果实，内源乙烯浓度从09/18开始明显上升，且在最后一次采样时达到高峰；在SPI=1.9处理的果实，内源乙烯浓度在处理后不断上升，在09/18达到高峰而后降低；而在SPI=3.5处理的果实，内源乙烯浓度在采样前期上升而后期降低。7.以SPI达1.2、1.9和3.5时外源MeJA处理后的‘金冠’果肉（含果皮）为试材，运用QPCR技术对LOX和AOS家族成员的相对表达量进行检测，发现SPI=1.2时外源MeJA处理后，除了MdLOX39与MdAOS2，其他基因的表达量在处理后第1d上调；在SPI=1.9时外源MeJA处理后，除了MdAOS2，其他基因的表达量也在处理后第1d上调，其中MdLOX22、MdLOX23和MdLOX28的表达量在整个采样期间均高于对照；在SPI=3.5时外源MeJA处理后，除了MdAOS2与MdAOS3，其他基因的表达量均在处理后第1d明显上调，并且在整个采样期间高于对照。