猪伪狂犬病毒gB基因主要抗原区的原核表达及其单克隆抗体的制备

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猪伪狂犬病(Pseudorabies, PR)是由猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的一种急性传染病。近年来,猪伪狂犬病的感染区域不断扩大,对世界各地的养殖业都造成了不同程度的经济损失,因此,建立有效的检测、诊断方法对控制乃至最终消灭猪伪狂犬病有着重要意义。本研究利用原核表达系统表达了PRV gB蛋白的主要抗原区;并分别以纯化的猪伪狂犬病毒(S株)和gB重组蛋白为免疫原制备单克隆抗体,最终,筛选得到6株能够稳定分泌PRV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。活性检测表明,杂交瘤细胞株2D8、3G7与猪瘟病毒(HCV)、猪圆环病毒(PCV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)及正常PK-15细胞均不反应,与猪伪狂犬病毒(PRV)有良好的反应原性;制备的腹水能够与PRV特异性结合。本研究为进一步建立高效、特异、敏感的检测方法及研制基因工程抗体奠定了基础。
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