耐酸性反硝化细菌的分离鉴定及处理酸性矿山废水应用研究

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地下水硝酸盐污染在全球范围内普遍存在,对水体环境和人类健康均会带来一定的危害,生物反硝化法因其具有经济、有效且不易产生二次污染的特点被广泛应用于地下水硝酸盐污染修复。一般,反硝化菌适用于中性或偏碱性条件,有关酸性条件下进行生物反硝化的报道尤为少见。因此,分离筛选出具有一定耐酸性的反硝化细菌,对于解决酸性矿山废水硝酸盐污染的治理有重要的研究意义。本研究自某铀矿水冶厂尾矿堆尾渣样及渗滤液样品开展反硝化菌的富集分离以及强反硝化能力菌株的筛选,并对筛选获得的菌株分别从形态学和分子生物学上进行鉴定;在此基础上研究了不同碳源类型、C/N、温度和pH等单因素对目标菌株脱氮性能的影响,并测定了菌株在最优脱氮条件下的生长曲线;最后,应用筛选获得的菌株进行了某铀矿酸性地下废水处理的初步研究。具体研究结果如下:(1)本研究从某铀矿水冶厂尾矿渣及渗滤液中得到10株反硝化菌株,通过BTB显色法和复筛选出两株具有良好反硝化能力的菌株,经鉴定为Acinetobacter sp.和Klebsiella sp.,暂命名为Acinetobacter sp.WS 2-2和Klebsiella sp.WS 4-2;两株菌均为革兰氏阴性细菌,扫描电镜观察均呈杆状。(2)通过单因素条件试验研究,菌株Acinetobacter sp.WS 2-2和Klebsiella sp.WS4-2选用的最优脱氮条件为:最优碳源为乙酸钠,最优C/N为15,最优pH为7,最优温度为30℃。且菌株Acinetobacter sp.WS 2-2和Klebsiella sp.WS 4-2在pH为4.5时对NO3--N的去除率可分别达49.35%和46.42%,表明其具有一定的耐酸性;在20℃时,其对NO3--N的去除率分别为51.82%和49.42%,表明其具有一定的耐低温能力。(3)通过不同接种量和不同菌株混合比处理实际酸性矿山废水,得出菌株Acinetobacter sp.WS 2-2和Klebsiella sp.WS 4-2的最优接种量为10%、最优菌株混合比为4:1。最优脱氮条件下,经96 h作用,混合菌对硝酸盐氮的去除率达97.58%,明显快于只接种单一菌株的水样,而后者需144 h对硝酸盐氮去除率才达90%以上。本研究筛选获得了2株具有较强反硝化能力的菌株Acinetobacter sp.WS 2-2和Klebsiella sp.WS 4-2,均具有一定的耐酸性和对温度具有广泛适应性,为酸性矿山硝酸盐废水和普通环境下的硝酸盐废水污染修复提供了候选菌株。
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