【摘 要】
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目的:本研究基于脂质过氧化-铁死亡通路探讨固本消积方含药血清对人肝癌HepG2细胞铁死亡的作用,为该方抗肝癌提供科学依据。方法:制备含药血清,实验分为固本消积方(GBXJ)含药血清组、空白血清组、MPP-I组(ACSL4激动剂)、LIP组(铁死亡脂质氧化抑制剂),采用CCK-8法,观察各组对人肝癌HepG2细胞增殖及IC50浓度;利用C11 BODIPY 581/591荧光探针来检测细胞内脂质过氧
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目的:本研究基于脂质过氧化-铁死亡通路探讨固本消积方含药血清对人肝癌HepG2细胞铁死亡的作用,为该方抗肝癌提供科学依据。方法:制备含药血清,实验分为固本消积方(GBXJ)含药血清组、空白血清组、MPP-I组(ACSL4激动剂)、LIP组(铁死亡脂质氧化抑制剂),采用CCK-8法,观察各组对人肝癌HepG2细胞增殖及IC50浓度;利用C11 BODIPY 581/591荧光探针来检测细胞内脂质过氧化情况;Western blot法检测细胞中特定蛋白ACSL4、LPCAT3、LOX、NOX1的表达水平。结果:(1)CCK-8试验发现,GBXJ含药血清对人肝癌HepG2细胞的增值抑制率其影响与剂量及时间呈正相关(P<0.05)。(2)经过CCK-8试验,利用SPSS21.0统计分析软件处理,进行直线回归分析,估计得到样本直线回归方程为:Y=0.032+0.026X;其中Y为增值抑制率,X为%含药血清。当Y为50%时,X=18,计算出,GBXJ含药血清对人肝癌HepG2细胞的IC50值为18%。(3)C11 BODIPY581/591荧光探针检测发现LIP组绿色荧光表达明显减少,而含药血清及M-PPI组均显著增多。(4)Western blot法检测发现经GBXJ含药血清干预后ACSL4、LPCAT3、LOX、NOX1的表达量都显著提高(P<0.01)。结论:固本消积方含药血清可通过调节ACSL4、LPCAT3、LOX、NOX1等脂质过氧化关键蛋白的表达,诱导人肝癌HepG2细胞铁死亡。
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