直肠癌手术中对肿瘤远端正常组织切除不足可能导致肿瘤的局部复发和远处转移。研究证实了直肠癌微淋巴管密度与转移和复发有关,还发现黏膜下微淋巴管癌栓是直肠癌壁内扩散的主要方式,是手术后局部复发的主要根源。但在肿瘤微环境中微淋巴管在直肠癌及其周围的变化规律尚不清楚,新生微淋巴管具有正常功能也未定论,新生淋巴管在直肠癌远端的生成长度可能影响肿瘤的局部复发和预后。　　本课题拟沿直肠纵轴方向自肿瘤中心向远切端连续切片,D2-40标记微淋巴管,在光镜下检测每张切片的微淋巴管密度和形态变化规律,并通过3D-doctor软件重建直肠癌淋巴管模型并进行统计分析。主要研究:①微淋巴管从肿瘤中心到手术远切缘之间的密度及形态变化规律;②统计分析微淋巴管密度与直肠癌淋巴结转移及转移复发关系;③三维重建直肠癌及其周围组织的微淋巴管分布情况,了解微淋巴管之间的关系,探讨新生微淋巴管是否具有正常的结构和功能。实验结果可以为研究直肠癌淋巴转移规律、手术中直肠远端切除长度的确定、放疗范围的估计等提供依据。　　材料与方法：　　(1)连续收集汕头大学医学院第二附属医院2011.05~2011.08手术切除且临床资料完整的直肠癌新鲜标本12例,全部病例术前均未接受放、化疗,术后均经病理确诊为直肠癌;另外,12例直肠癌标本均取距肿瘤6cm远的正常直肠组织作正常对照。患者术后均随访一年,无死亡及失访病例。　　(2)应用免疫组织化学SP法检测经D2-40标记的微淋巴管,计数微淋巴管密度(LMVD),计量直肠癌组织中新生淋巴管的生长长度,分析微淋巴管密度与新生淋巴管长度的相关关系及微淋巴管密度、新生淋巴管长度与肿瘤转移复发的关系及淋巴管生成特点及其与临床病理参数之间的关系。　　(3)应用SPSS17.0统计软件对数据进行统计学分析。　　结果：　　(1)微淋巴管计数从肿瘤远端向手术远切缘逐渐减少,淋巴管平均生长长度为(1.816±1.28)。四例淋巴管的表达急剧下降在1 cm内的直肠癌远端。其余八例中淋巴管的表达下降在1.5cm的直肠癌远端(4例),2cm(2例)和2.5cm(2例)。　　(2)直肠癌淋巴管生成主要发生在肿瘤边缘区,与正常直肠组织淋巴管(LMVD11.5±4.54 vs2.42±1.5),对比差别有显著的统计学意义(P<0.01)。　　(3)直肠癌边缘区高LMVD与肿瘤组织的淋巴结转移(P<0.05)及复发密切相关(P<0.05)。　　(4)直肠癌平均微淋巴管数与直肠癌转移复发密切相关,复发转移组的 LMVD显著高于阴性组(9.64±0.82 vs5.76±3.11),对比差别有显著的统计学意义(P<0.05)。　　(5)经 Spearman等级相关分析,直肠癌中 LMVD计数与淋巴管生长长度呈显著性相关(rs=-0.651, P<0.01)。　　(6)经3D-doctor三维重建显示肿瘤中心淋巴管数目少,呈扁平或塌陷状态;肿瘤边缘淋巴管数目多,呈扩张状态。　　结论：　　(1)所有标本中淋巴管的平均表达水平在肿瘤组织远端3厘米处减少,且更靠近直肠癌组织的新生淋巴管和淋巴管密度是最大的,逐渐远离此区域的新生淋巴管和淋巴管密度逐渐减少。因此手术应切除这些新生淋巴管以防止局部复发和提高生存率。　　(2)直肠癌边缘区高LMVD与肿瘤组织的淋巴结转移密切相关。直肠癌边缘区LMVD是判断肿瘤淋巴管生成和淋巴结转移的重要指标。　　(3)淋巴管在肿瘤中心呈扁平或塌陷状,且淋巴管长度较短,与周围淋巴管无明显的连接;而在肿瘤边缘呈扩张状,淋巴管长度较长,与周围淋巴管有明显的连接,形成网络状。因此认为肿瘤边缘区淋巴管具有功能,并且与肿瘤转移复发存在一定关系。