利用大豆甾醇生产医药中间体ADD工艺研究

来源 :哈尔滨理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xqjulia
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本文通过对野生菌株诱变后筛选得到节杆菌A-6。这是一种可以把大豆甾醇降解为甾体化合物(ADD)分解酶缺陷型的菌株,通过将它进一步诱变处理可以获得生产ADD的高产菌株。在我们的实验中获得的节杆菌A-609,可以使大豆甾醇降解率达到为97%。大豆甾醇降解后分离得到的产品经工厂试用符合医药中间体要求。 实验证明硫酸镍、硫酸钴、8-羟基喹啉、α,α’联吡啶等酶抑制剂对ADD的积累有明显的促进作用,节杆菌A-609在0.06%的硫酸镍存在下ADD产率可达53.5%。 在生物法生产甾体药物的过程中,底物浓度和投加方式是一个至关重要的工艺参数。将底物大豆甾醇先溶于用二甲基甲酰胺与乙醇复合溶液,然后在微波振荡下加入培养液,形成均相的发酵体系。节杆菌A-609发酵时间、搅拌速度、通气量、底物加入时间以及抑制剂加入时间对ADD产率都有很大的影响。实验中得到的ADD产率达69%左右,这说明节杆菌A-609可以作为ADD工业化生产菌株。 节杆菌A-609,在模拟工业化生产条件下,ADD生产达到如下指标:大豆甾醇发酵浓度1%,ADD发酵收率58.5%,精制收率72.5%,ADD纯度大于95%。以上数据说明ADD的生产技术水平达到了可进行工业化生产中间试验的程度。
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