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目的:考察酸枣仁合欢方不同制备工艺的抗抑郁作用,以确定最佳制备工艺;应用均匀设计法寻求酸枣仁合欢方抗抑郁作用的最佳配比关系;并初步建立全方的质量控制方法;筛选酸枣仁合欢方抗抑郁作用的有效部位。方法:1、选用经典的抗抑郁药评价动物模型——小鼠强迫游泳实验、小鼠悬尾实验、空场实验和拮抗利血平所致的体温降低等实验,分别以小鼠不动时间、自主活动数和体温下降值作为评价指标,考察酸枣仁合欢方的抗抑郁作用,并对其最佳制备工艺进行初步筛选。采用的不同制备工艺包括:水提取法、醇提法、醇提结合X-5或AB-8大孔吸附树脂等提取方法。2、在已确定酸枣仁合欢方最佳制备工艺的基础上,以均匀设计法寻求该方抗抑郁作用的最佳配比。试验中采用均匀设计处理方法与药效实验(小鼠强迫游泳实验、小鼠悬尾实验、空场实验和拮抗利血平所致的体温降低实验)相结合的方法,分别以小鼠不动时间、自主活动数和体温下降值作为评价指标,研究酸枣仁合欢方的抗抑郁作用,并通过多元统计学分析方法优选出各单味药的最佳配比。3、用薄层色谱法对复方中酸枣仁、白芍进行定性鉴别;用紫外分光光度法定量测定复方中总黄酮的含量;高效液相色谱法定量测定复方中的指标成分酸枣仁皂苷A含量,从而为制定复方质量标准提供依据。4、根据复方各药材中主要包含黄酮类和皂苷类成分,选用柱色谱法和溶剂萃取法提取分离总黄酮和总皂苷部位,并经小鼠悬尾实验和拮抗利血平所致的体温降低等抗抑郁药效学实验比较,以期阐明药物抗抑郁作用的有效部位,并为酸枣仁合欢方质控标准的进一步完善提供参考。结果:1、在小鼠悬尾实验和强迫游泳实验中,醇提法结合AB-8组与模型组比较均能显著缩短小鼠不动时间,表现出抗抑郁作用。其余组虽能不同程度的缩短不动时间,但差异无统计学意义。空场实验表明各组间小鼠自主活动无显著性差异。在利血平所致体温降低实验中,AB-8组在1h,4h时拮抗利血平所致体温下降作用明显,与模型对照组相比均有显著性差异。2、应用均匀设计法结合药效学实验筛选出酸枣仁合欢方中四味中药的最佳剂量配比分别为酸枣仁24.00g:合欢皮14.00g:白芍6.00g:柏子仁10.00g。3、薄层色谱中,观察到与对照品及对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。紫外分光光度法测定酸枣仁合欢方中总黄酮含量,测得芦丁对照品溶液浓度在8.5~25.5μg.mL-1范围内线性关系良好,其线性方程为:Y=0.0225X+0.0229。平均回收率(n=3)为101.4%,RSD=0.61%。高效液相色谱法测定酸枣仁合欢方中指标成分酸枣仁皂苷A含量,结果表明酸枣仁皂苷A浓度在0.6~3.0μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9999),其线性方程为:Y=1.2299X+13.295。平均回收率(n=3)为99.98%,RSD=1.19%。该方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,为酸枣仁合欢方质量标准的建立和安全用药提供科学依据。4、在小鼠悬尾实验和游泳实验中,总皂苷组、全方组与模型组比较均能显著缩短小鼠TST和FST不动时间,表现出抗抑郁作用;总黄酮组虽能缩短小鼠TST和FST不动时间,但无统计学意义(P>0.05)。空场实验表明各组间小鼠自主活动无显著性差异。在利血平拮抗实验中,总皂苷组和全方组在4h时均可显著拮抗小鼠体温下降(P<0.05),总黄酮组在一定程度上可拮抗小鼠体温下降,但无统计学意义(P>0.05)。结论:与药效学相结合优选出酸枣仁合欢方抗抑郁作用的最佳制各条件,具有与功能主治密切结合的特点,所得最佳提取工艺条件适合工业生产;酸枣仁合欢方的最佳剂量配比经药效学验证,组方抗抑郁效果显著;说明应用均匀设计、数理统计与药效学分析相结合的方法确定复方药用量的方法是可行的。本研究所建立的酸枣仁皂苷A及总黄酮含量测定方法简单、准确,能够用于酸枣仁合欢方中酸枣仁皂苷A和总黄酮的质量控制;经药效学实验初步确定了总皂苷为复方抗抑郁的有效部位。