洋金花对实验性PD大鼠脑CPU中酪氨酸羟化酶及细胞凋亡影响的研究

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目的:观察单味药洋金花细粉对帕金森病(PD)大鼠模型行为学、细胞和分子水平上的影响,并探讨其作用机制。方法:本实验采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)注入纹状体尾壳核(CPU)的方法,在Wistar大鼠身上复制出偏侧PD模型,以美多巴为阳性对照药物,连续给药后观察给药前后大鼠30min旋转次数的行为学变化,于麻醉后心脏灌注多聚甲醛处死大鼠后迅速取出脑组织按ABC法检测损毁侧黑质或纹状体中酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞表达情况及TUNEL法检测损毁侧黑质或纹状体的细胞凋亡。结果:1.洋金花各给药组对阿扑吗啡诱导的旋转行为有明显改善,旋转圈数与模型组相比较明显减少。洋金花高、中剂量组P<0.01:低剂量组P<0.05,两者有统计学差异。2.TH免疫组化结果表明:PD大鼠模型毁损侧黑质部位多巴胺神经元明显减少,纹状体部位多巴胺神经元纤维终末光密度值明显降低,与模型组相比,洋金花治疗组大鼠毁损侧黑质多巴胺神经元数量明显增多,纹状体部位TH阳性纤维的相对光密度值明显增强,洋金花高、低剂量组P<0.05,两者有统计学差异。3.原位细胞凋亡结果表明:模型组镜下见有大量密集分布的阳性凋亡细胞,细胞核呈棕褐色,圆形或不规则,部分细胞核裂解成多个深棕色凋亡小体,洋金花治疗组大鼠镜下见阳性凋亡细胞数比模型组明显减少,呈散在分布,差异显著,洋金花各剂量组P<0.05,两者有统计学差异。结论:本研究发现,单味药洋金花粉末对PD大鼠模型有较好的治疗作用,其能够明显改善PD大鼠行为学、明显增高TH阳性细胞的表达、抑制阳性细胞凋亡。本课题通过对PD大鼠模型的实验研究,首次对临床上具有确定疗效的洋金花粉末进行了系统研究,在行为学、细胞和分子水平上为洋金花治疗PD的作用机制提供实验依据,也为中药治疗PD的实验研究提供新的方法依据。
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