牙周炎大鼠被动吸烟牙周及肺组织形态学观察

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目的:通过建立牙周炎大鼠被动吸烟模型,观察被动吸烟12周大鼠牙周组织、肺组织形态学变化,通过免疫组化的方法检测大鼠牙周组织、肺组织中MMP-9的表达,初步探讨被动吸烟对牙周组织、肺组织的影响,以及牙周炎与肺组织的关系。方法:选用6月龄健康雄性SD大鼠40只,体重300g左右,随机分为正常对照组(正常组)、被动吸烟组、单纯牙周炎组(牙周炎组)、被动吸烟伴牙周炎组(牙周炎吸烟组),每组十只。正常组不加干预措施,正常喂养。牙周炎组及牙周炎吸烟组大鼠以直径0.20mm的正畸钢丝结扎双侧上颌第一磨牙牙颈部,从结扎当天开始喂食糖水(葡萄糖100g/L)。被动吸烟组及牙周炎吸烟组大鼠采用密闭空间内熏香烟的方法进行被动吸烟的干预。各组动物分别于12周处死,取肺组织、上颌骨。10%甲醛溶液中固定48小时后,制作肺组织切片,并将上颌骨置于10%EDTA溶液中脱钙8周,制作牙体牙周组织联合切片。各组切片HE染色,光镜下观察肺组织、牙周组织形态学变化;免疫组织化学染色法(PV法)检测各组肺组织、牙周组织中MMP-9的表达分布,作统计学分析。结果:1大鼠牙周炎动物模型建立:牙周结扎动物上颌第一磨牙牙体牙周组织切片镜下观察:结扎4周,上皮下结缔组织内见炎细胞浸润;牙周膜见血管扩张;结合上皮根方增殖,形成牙周袋;破骨细胞活跃,出现牙槽骨吸收。说明大鼠牙周炎模型已经成功建立。2牙周组织、肺组织镜下观察:2.1牙周组织镜下观察:正常组:龈乳头形态基本完好,沟内上皮无明显炎细胞浸润,结合上皮生长于釉质牙骨质界处,牙龈、牙周膜纤维整齐而有序,牙槽嵴顶未见吸收。被动吸烟组:牙龈乳头结构不良,结缔组织内可见淋巴细胞、中性粒细胞等炎细胞浸润。牙槽骨轻度吸收。牙周炎组:上皮下结缔组织内出现炎细胞浸润,结合上皮向根方增殖,牙周袋形成,破骨细胞活跃,牙槽嵴顶高度降低。牙周炎吸烟组:牙龈乳头结构破坏,牙龈上皮下方结缔组织中大量中性粒细胞、淋巴细胞等炎细胞浸润,形成深牙周袋、出现牙槽骨垂直吸收。2.2实验大鼠肺组织镜下观察:正常组:支气管壁仅微量炎细胞浸润,小气道管壁规整未见明显炎细胞浸润,肺间质未见炎细胞聚集及血管充血。牙周炎组:肺组织结构与正常组表现基本一致,仅在肺间质偶见轻度血管充血现象。被动吸烟组:局部出现了支气管壁、小气道壁炎细胞聚集,间质内血管充血,管壁大量炎细胞浸润等现象,但未形成大范围的改变。牙周炎吸烟组:出现了支气管壁大量浆细胞、淋巴细胞为主的炎细胞聚集,小气道壁炎细胞聚集,肺间质炎细胞聚集,血管扩张充血等。但是改变仅限于某些区域的组织,并未引起全肺性的典型病理变化。3免疫组化检测实验大鼠牙周组织、肺组织中MMP-9的表达3.1免疫组化检测实验大鼠牙周组织MMP-9的表达MMP-9的阳性表达为棕色或棕黄色颗粒,主要位于牙龈、牙周膜成纤维细胞,中性粒细胞等细胞中。四组个实验组的平均光密度值分别为:正常组:0.1374;被动吸烟组:0.2044;牙周炎组:0.2100;牙周炎吸烟组:0.2822。3.2免疫组化检测实验大鼠肺组织MMP-9的表达MMP-9的阳性表达为棕色或棕黄色颗粒,主要位于肺泡巨噬细胞,肺泡细胞,中性粒细胞等细胞中。四个实验组的平均光密度值分别为:正常组:0.1230;牙周炎组:0.1244;被动吸烟组:0.2380;牙周炎吸烟组:0.2998。结论:1正畸钢丝结扎成功建立大鼠牙周炎模型。2被动吸烟加重牙周组织炎症改变,是牙周炎的重要危险因素。3被动吸烟条件下肺组织中MMP-9的表达上调,提示被动吸烟是肺组织改变的危险因素。4在被动吸烟与牙周炎同时存在的条件下,肺组织中MMP-9的表达上调。提示牙周炎可能与加重肺组织炎症性改变有关。
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