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GHSR(促生长激素分泌素受体)是Ghrelin(胃生长素)的受体,Ghrelin是含28个氨基酸残基的具有多种生理功能的脑肠肽,其中一个重要功能就是参与代谢的调节。Ghrelin具有启动摄食、增进食欲、增加营养物质尤其是脂类的吸收、促进脂肪形成等多方面的作用,分泌过多可导致代谢紊乱和肥胖,因此,Ghrelin系统被认为是能量代谢紊乱和肥胖形成的分子生物学靶点之一。自从ghrelin的发现以来,越来越多的证据表明ghrelin在信号通路和逆转能量不足方面起着非常重要的作用。例如,当食物被剥夺时,ghrelin的水平会升高:小鼠给ghrelin会刺激进食,增加体重,导致肥胖。有文献报道GHSR敲除的小鼠相比于野生型小鼠,在CSDS模型刺激后表现出更明显的社交回避现象,表明GHSR敲除的小鼠在CSDS模型刺激后抑郁倾向比野生型小鼠更严重。GHSR敲除的小鼠相比野生型的小鼠虽然在体重方面没有明显的改变,但GHSR敲除的小鼠相比于野生型的小鼠进食量明显减少。以前的研究告诉我们敲除GHSR使小鼠在面对慢性刺激时比野生型小鼠更容易产生抑郁,而且GHSR敲除会使小鼠的能量摄取明显减少,但目前还没有形态学方面的证据来表明GHSR敲除的小鼠和野生型的小鼠相比,在神经元的结构方面有任何改变。GHSR敲除的小鼠的树突的形态有无改变,目前还没有文献报道。我们使用传统的高尔基染色的方法来研究GHSR敲除的小鼠相比野生型的小鼠的椎体神经元的树突数目以及树突棘的密度有无改变,为GHSR敲除的小鼠在CSDS刺激后更容易出现抑郁样行为提供形态学的依据。这篇研究的目的是为了研究GHSR-/-的小鼠和对照组GHSR+/+的小鼠的椎体神经元的形态:树突的数目以及树突棘的密度有无改变。我们用GHSR+/-的亲代交配得到的子代有GHSR+/+,GHSR--和GHSR+/-这三种可能的基因型,通过基因鉴定确定子代小鼠的基因型,子代小鼠中GHSR-/-的小鼠即为我们本实验中实验组的小鼠,GHSR+/+即为本实验中我们对照组的小鼠,为了排除性别差异可能造成的影响,我们采用同窝生的性别相同的小鼠基因鉴定结果分别为GHSR-/-和GHSR+/+进行配对研究。基因鉴定的结果:GHSR+/-有俩条条带,分别是175bp和354bp,GHSR-/-的小鼠在175bp处有一条条带,GHSR+/+的小鼠的在354bp处有一条条带。我们实验小鼠为三个月大,将同窝生的GHSR+/+的小鼠作为对照组,将同窝生的GHSR-/-的小鼠作为实验组,经过高尔基染色后,在光学显微镜下,分别取俩组小鼠的皮层的椎体神经元进行分析,研究在实验组和对照组中,神经元的树突的数目,树突棘的密度有无明显改变。高尔基染色是经典的细胞染色方法,实验用的小鼠为3个月大的GHSR+/+和GHSR--的小鼠,实验时取同窝生的GHSR+/+和GHSR--的雄性小鼠配成对,将同窝生的GHSR+/+和GHSR-/-的雌性小鼠配成对。配对之后我们得到了三对包含GHSR+/+和GHSR-/-的雄性小鼠(共6只)和三对包含GHSR+/+和GHSR-/-的雌性小鼠(共6只)。神经元的树突数目我们的实验结果表明GHSR敲除的小鼠的树突数目变化与小鼠的性别有关:GHSR敲除的雄性小鼠的总树突数目相比于对照组明显减少(P<0.001),GHSR敲除的雄性小鼠的总树突数目为14.75±0.957427,对照组的雄性小鼠的总树突数目为22.42857±1.812654。其中GHSR敲除的雄性小鼠一级树突的数目为3.75±0.957427,对照组的雄性小鼠的一级树突的数目为5.625±0.517549。GHSR敲除的雄性小鼠二级树突的数目为5.5±1,对照组的雄性小鼠的二级树突的数目为7.625±0.744024。GHSR敲除的雄性小鼠三级树突的数目为5.5±0.57735,对照组的雄性小鼠的三级树突的数目为9.285714±1.253566。GHSR敲除使雄性小鼠皮层区椎体神经元总树突的数目明显减少。GHSR+/+的雌性小鼠的总树突数目相比于GHSR-/-的雌性小鼠的总树突数目没有明显改变。GHSR+/+的雌性小鼠的总树突数目为28.83333±3.169045,GHSR-/-的雌性小鼠的总树突数目为27.6±3.19089。其中GHSR+/+的雌性小鼠一级树突的数目为5.5±0.547723,GHSR-/-的雌性小鼠一级树突的数目为5.4±0.894427。GHSR+/+的雌性小鼠的二级树突的数目为10.66667±1.032796,GHSR-/-的雌性小鼠二级树突的数目为 9.2±1.095445。GHSR+/+的雄性小鼠的三级树突的数目为12.66667±0.816497,GHSR-/-的雌性小鼠三级树突的数目为12±1.414214。神经元的节点数目我们分别统计了一级树突,二级树突和三级树突上节点的数目,结果表明GHSR-/-的雄性小鼠的一级树突,二级树突和三级树突的节点数目相对与GHSR+/+的雄性小鼠明显减少(P<0.05)。GHSR-/-的雌性小鼠的一级树突,相比与GHSR+/+的雄性小鼠没有明显改变(P>0.05),而GHSR-/-的雌性小鼠的二级树突,三级树突相比与GHSR+/+的雄性小鼠明显减少(P<0.05)。神经元的树突棘的密度比较GHSR+/+和GHSR-/-的雄性小鼠和雌性小鼠的大脑某一区域的椎体神经元的顶树突上二级树突上树突棘的密度是通过计算椎体神经元上20um长度的二级树突上树突棘的数目来反映树突棘的密度。树突棘的数目越多,说明树突棘的密度越大;相反,树突棘的数目越少,说明树突棘的密度越小。GHSR+/+的雄性小鼠皮层区椎体神经元二级树突上每20um长度树突棘的数目为15.5±1.290994,GHSR-/-的雄性小鼠皮层区椎体神经元二级树突上每20um长度树突棘的数目为9.6±0.547723。GHSR-/-的雄性小鼠的树突棘密度相比于GHSR+/+的雄性小鼠树突棘密度明显减少(p<0.001)。GHSR+/+的雌性小鼠皮层区椎体神经元二级树突上每20um长度树突棘的数目为17.6±1.81659,GHSR-/-的雌性小鼠皮层区的椎体神经元二级树突上每20um长度树突棘的数目为18.2±1.30384。GHSR-/-的雌性小鼠相比于GHSR+/+的雌性小鼠的树突棘密度没有明显改变(P>0.05)。我们也统计了海马区CA1和CA3的椎体神经元上的树突棘密度,发现不论是雄性小鼠还是雌性小鼠,海马区椎体神经元上的树突棘密度没有发生明显的改变(P>0.05)。GHSR+/+的雄性小鼠CA1区每20um的二级树突上树突棘的数目为23.16667±1.169045,GHSR-/-的雄性小鼠上CA1区每20um树突棘的数目为20.83333±1.47196;GHSR+/+的雌性小鼠CA1区每20um的二级树突上树突棘的数目为24.4±1.140175,GHSR--的雌性小鼠CA1区上每20um树突棘的数目为23.85714±1.345185。GHSR+/+的雄性小鼠CA3区每20um的二级树突上树突棘的数目为21.42857±1.718249,GHSR-/-的雄性小鼠上CA3区每20um树突棘的数目为21.16667±2.136976;GHSR+/+的雌性小鼠CA3区每20um的二级树突上树突棘的数目为23±0.894427,GHSR-/-的雌性小鼠CA3区上每20um树突棘的数目为21.33333±2.42212。