论文部分内容阅读
目的：观察三肽化合物酪丝亮肽的抗肿瘤作用，初步探讨其可能的作用机制。 方法：建立移植性腹水型肝癌H22小鼠动物模型，观察酪丝亮肽对荷瘤小鼠生存时间的影响；建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型，观察酪丝亮肽对荷瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用；建立人肝癌BEL-7402细胞体外培养体系，观察酪丝亮肽体外抑癌作用。 体外培养BALB／c小鼠腹腔巨噬细胞，观察酪丝亮肽体外对巨噬细胞杀伤肿瘤细胞BEL-7402及B16-F10的影响；体外培养经酪丝亮肽药物注射7天的BALB／c小鼠及裸鼠腹腔巨噬细胞，观察酪丝亮肽体内对巨噬细胞杀伤肿瘤细胞BEL-7402及B16-F10的影响；碳廓清实验观察酪丝亮肽对单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响；观察酪丝亮肽对腹腔巨噬细胞分泌合成IL-1β、TNF-α和NO等细胞毒效应分子的影响；动态观察酪丝亮肽对体外培养鼠巨噬细胞株RAW264.7分泌合成IL-1β和NO的影响。 结果：酪丝亮肽能显著延长腹水型肝癌H22小鼠的生存时间，给药剂量为80μg／kg／d时疗效最显著，达到69.24％，在20μg／kg／d-80μg／kg／d剂量范围内生命延长率为50-70％，给药剂量与荷瘤鼠生存时间呈现一定量效关系；酪丝亮肽能显著抑制人肝癌BEL-7402移植瘤裸鼠的肿瘤生长，给药剂量为160μg／kg／d时疗效最显著，抑制率为44.03％，并且在40-320μg／kg／d剂量范围内抑制率为25-50％，给药剂量与肿瘤抑制率呈现一定量效关系；酪丝亮肽体外对人肝癌BEL-7402细胞生长有一定的抑制作用，在作用72hrs时各浓度酪丝亮肽对肿瘤细胞的抑制作用较24hrs、48hrs、96hrs明显，其中浓度为100μg／ml时抑制率达19.36％；酪丝亮肽体内外均能增强小鼠腹腔巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤：体外作用中巨噬细胞对BEL-7402、B16-F10的杀伤功能明显增强，与效应细胞对照组相比有显著性差异（P＜0.05）杀伤率分别达到35.58％、61.2％；体内作用中巨噬细胞对BEL-7402、B16-F10的杀伤功能明显增强，与生理盐水对照组相比有显著性差异（P<0 .05），杀伤率分别达到21.39%、47.63%;裸鼠腹腔巨噬细胞经酪丝亮肤作用后对BEL一7402、B 16一F10杀伤功能明显增强，与生理盐水对照组相比有显著性差异（P<0.05），最高杀伤率分别达到32.86%、73.07%;酪丝亮肤能增强单核巨噬细胞系统的吞噬功能，吞噬指数与生理盐水组比较有显著性差异（P<0.05）;酪丝亮肤体外作用能促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌合成细胞毒效应分子IL一lp、TNF一Q和NO，与效应细胞对照组相比有显著性差异（P<0.05）;酪丝亮肤体内作用能促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌合成细胞毒效应分子IL一lp、TNF一Q和NO，与生理盐水对照组相比有显著性差异（P<0.05）;酪丝亮肤能促进鼠巨噬细胞株R戌W264.7分泌合成IL一1p和NO，IL一1日、NO水平分别在酪丝亮肤作用24hrs、12hrs时达到高峰，酪丝亮肤单独应用能提高巨噬细胞的分泌合成功能，而且酪丝亮肤能与LPS协同作用刺激巨噬细胞的细胞毒效应分子分泌合成。结论:酪丝亮肤对实验性肝癌有明确抑制作用，能直接杀伤肿瘤细胞，诱导肿瘤细胞坏死、凋亡，发挥抗肿瘤作用;酪丝亮肤能增强单核巨噬细胞的细胞毒功能、吞噬功能及细胞毒效应分子分泌合成功能，通过激活单核巨噬细胞系统杀伤肿瘤细胞。