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目的:探讨重组干扰质粒pshRNA-COX-2对人肝癌细胞Hep3B裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤血管生成的抑制作用,以及对肿瘤细胞凋亡的促进作用。方法:将重组干扰质粒pshRNA-COX-2和阴性对照质粒pshRNA-HK经测序鉴定正确后分别转染Hep3B细胞,G418抗性筛选单克隆细胞株,RT-PCR和Western blot分别检测COX-2 mRNA和蛋白表达,同时RT-PCR检测VEGF mRNA表达。将Hep3B单克隆细胞株及未转染Hep3B细胞分别种植于裸鼠皮下,每3天测量1次肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线。4周后处死裸鼠,测定肿瘤体积,RT-PCR和Western blot分别检测肿瘤组织COX-2 mRNA和蛋白表达,免疫组织化学法检测肿瘤组织中COX-2蛋白表达和肿瘤微血管密度(MVD),电镜观察和TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果:与未转染细胞相比,干扰组COX-2 mRNA和蛋白表达抑制率分别为65.3%和52.8%(P<0.05),干扰组VEGF mRNA表达抑制率为56.5%(P<0.05)。与转染阴性对照质粒的细胞相比,干扰组COX-2 mRNA和蛋白表达抑制率分别为54.6%和43.5%(P<0.05),干扰组VEGF mRNA表达抑制率为44.6%(P<0.05)。干扰组最终瘤体大小明显小于阴性组和空白组(P<0.01)。与空白组相比,干扰组肿瘤组织中COX-2 mRNA和蛋白表达抑制率分别为48.5%和61.4%(P<0.05)。与阴性组相比,干扰组肿瘤组织中COX-2 mRNA和蛋白表达抑制率分别为41.8%和55.7%(P<0.05)。干扰组COX-2得分和MVD均明显低于阴性组和空白组(P<0.01),电镜观察显示干扰组凋亡细胞增多,TUNEL法显示干扰组肿瘤细胞凋亡指数明显高于阴性组和空白组(P<0.01)。结论:重组干扰质粒pshRNA-COX-2通过靶向抑制COX-2表达明显抑制人肝癌细胞Hep3B裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤血管生成,同时明显促进肿瘤细胞凋亡。