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背景与目的小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis, TIF)是各种原因导致的肾脏损害进展至终末期的共同途径。由于小管间质区域约占正常肾脏组织结构的90%左右，因此与肾小球损害相比，小管间质区域受损对肾脏功能的影响更为突出[1]。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitors ofmetalloproteinases, TIMPs)代谢紊乱参与TIF进程中细胞外基质(extracellularmatrix, ECM)重构及肾脏瘢痕形成。本研究旨在探讨小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis, TIF)进程中C型利钠肽(C-type natriuretic peptide, CNP)对基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)及其组织抑制因子(tissueinhibitors of metalloproteinases, TIMPs)的调控效应。方法本实验分为两部分：（一）动物模型的建立：选用健康雄性8周龄Wistar大鼠48只。随机分为8组，每组6只，其中4组为单侧输尿管梗阻(unilateral ureteralobstruction, UUO)模型组，4组为假手术(sham-operated rats, SOR)组。消毒铺巾，以2%水合氯醛（0.2ml/kg）腹腔注射麻醉，取左侧腹纵行切口。UUO模型组分离暴露左侧输尿管，在近肾门中上端1/3处以4-0丝线双重结扎后离断，逐层关腹；假手术组仅分离暴露左侧输尿管即逐层关腹。分别于术后3d、1m、2m和3m心脏穿刺处死大鼠，留取左侧肾脏。（二）实验室检验：血、尿液生化指标检测：所有大鼠处死前均禁食自由饮水置于代谢笼中收集24h尿液，双缩脲比色法进行尿蛋白定量。术中腹主动脉留取血液标本2ml，3000r/min离心5min分离血清，标准酶法测定血清总蛋白(total protein, TP)、白蛋白(albumin, Alb)、尿素氮(bloodurea nitrogen, BUN)和肌酐(creatinine, Cr)浓度。肾脏病理分析：肾脏组织离体后立即予以生理盐水灌洗，灭菌纱布吸干称重，计算肾重/体重比值(the ratio ofkidney weight to body weight, KW/BW)，测量肾皮质厚度。肾脏组织以4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，4μm切片，HE染色。参照Park等[9]报道，在100倍光镜下随机选择20个不重叠视野，将TIF分为正常、轻度、中度和重度四级，分别赋值0~3分。荧光定量PCR、免疫组化和western blot检测单侧输尿管梗阻UUO大鼠术后1d、1m、2m和3m时肾脏CNP、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和IV型胶原(type IV collagen, Col-IV)mRNA和蛋白的表达情况。结果UUO大鼠CNP、MMP-2和MMP-9mRNA表达虽然随TIF进展逐渐降低，但却显著高于相同观察时间点假手术SOR组(P<0.05)；与此相反，UUO大鼠TIMP-1和TIMP-2mRNA表达随TIF进展逐渐升高，至术后2m和3m时显著高于SOR组(P<0.05)。上述各观察指标在转录水平的表达趋势同样被免疫组化和westernblot实验所印证，其综合效应是促进Col-IV表达上调、推动纤维化进展。结论TIF进程中肾脏组织CNP表达衰减可能是导致MMPs/TIMPs代谢紊乱和细胞外基质过度沉积的重要因素。