草鱼生长激素分离、单抗制备及酶免疫测定技术建立和应用的研究

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该项研究采用生物化学、免疫学及分子生物学技术等对草鱼垂体生长激素分离纯化、抗体制备、免疫测定技术建立以及GH基在在鱼类细胞中的表达等进行了深入、系统的研究,获得的主要结果如下:1.从草鱼新鲜垂体中分离提纯出gcGH和gcPRL.2.用纯化的csGH、gcGH及gcPRL免疫兔子制备了各自特异的抗血清.3.根据激素--受体反应的原理,对合ELISA和RRA铖点,应用鱼类肝细胞膜本制剂和纯化的鱼类GH及其抗体,成功地建立了测定鱼类GH生物活性的酶联免疫吸附受体测定法(ELISA--RA).4.应用gcGH免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和3次克隆化培养后,成功地建立了2株能分泌抗草鱼GH单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1D2B93E8A5),琼脂双扩散测定表明这二株强阳性杂交瘤细胞所分泌单克隆抗体均为IgG2b型.5.应用gcGH单克隆抗体作包被抗体,兔抗gcGH血清作后续复盖抗体、用纯化的草鱼GH作标准品,建立了能测定几种鲤科鱼类垂体及血液中微量生长激素的夹心式ELISA测定系统.6.研究了不同 生长阶段草鱼的生长情况及其体内GH的季节性和日周期性变化规律.7.借助RT--PCR和Western blot技术研究了虹鳟金属硫蛋白基因A启动子--鲢生长激素基因重组质粒(p
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