锯缘青蟹碱性磷酸酶结构与功能的研究

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以锯缘青蟹(Scylla serrata)内脏为提酶材料,通过正丁醇处理、硫铵分级分离、DE-32、Sephadex G-150及EDAE-Sephadex A50柱层析纯化,获得电泳和FPLC层析单一纯的碱性磷酸酶制剂,比活力为3320U/mg.测定该酶的等电点为4.8,分子量为78kd,含742个氨基酸残基,由两个同型亚基组成.在0.01mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.5)中,该酶的紫外吸收峰 在278nm处,内源荧光激发峰在282nm处,荧光发射峰在335nm处,酶的园二色光谱(CD谱)显 示在208nm和218nm处出现双负峰,α-螺旋度含量约28.5%.
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