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小麦面筋蛋白富含免疫原性肽段,会触发乳糜泻患者T细胞应答而导致小肠炎症反应。乳糜泻患者需严格执行无面筋饮食。若能筛选到低致敏甚至是无致敏性的小麦种质,将有望从源头上解决乳糜泻患者的食品安全问题。在低致敏小麦品种的筛选工作中,准确定量小麦中的特异性T细胞表位是关键技术。现有的商业化的面筋检测方法不能区别免疫原性的表位及非免疫原性的变体表位。因此,本研究采用基于面筋蛋白致乳糜泻T细胞表位单克隆抗体的免疫印迹法及高通量测序法定量检测小麦样本中的致乳糜泻表位,以期望更准确的评价小麦品种的乳糜泻致敏性,筛选到低致敏甚至是无致敏性的小麦品种。整个研究的主要结果与结论如下:1.采用单克隆抗体Glia-α9、α20定量了112种成都小麦品种乳糜泻T细胞表位含量。结果显示有14个品种T细胞表位含量较低,有望通过它们选育低致敏小麦品种,开发适合于乳糜泻患者食用的安全谷物食品。2.“中国春”小麦致敏性相对较高,不适合用其开发低面筋食品。但它具有易杂交、产量稳定、适应性强、遗传学稳定等优点,可以作为对照品用于基于单克隆抗体筛选低致敏小麦品种的研究。3.糯小麦SN79、SN80及紫糯小麦SN81等三个小麦品种,致乳糜泻T细胞表位含量较低,可作为母本,用于培育低致敏糯性小麦,开发无面筋食品,使其具备无致敏性及糯性小麦的双重优点。4.用高通量测序研究结果表明,小麦SN98、SN103两个样本在乳熟期到蜡熟期阶段,颗粒中α-gliadin片段的表达情况存在较大的差异,共获得45种不同的α-gliadin蛋白片段序列(UPF),其丰度值从0.141到7.991不等。5.在小麦SN98、SN103两个样本中,共获得3种DQ2.5-Glia-α1变体表位、6种DQ2.5-Glia-α2变体表位及5种DQ2.5-Glia-α3变体表位,各变体表位的频率从0.002到1.072不等。6.对于两个小麦样本SN98、SN103,总的表位(DQ2.5型乳糜泻T细胞表位及变体表位)频率,DQ2.5型乳糜泻T细胞表位频率差异均不明显,很难判断出其致敏性的高低,有待后续进一步的研究。