目的:四黄散源于明代王肯堂的《证治准绳》,由黄连、黄柏、黄芩、大黄4味中药组成,具有活血祛瘀,通络消肿止痛作用,临床上用于治疗软组织损伤、骨折等疗效显著。为进一步开发利用该中药制剂,本课题参照医疗机构制剂批准文号申报资料项目要求,根据新药研究方法和方案,结合中药先进剂型,对该制剂的制备工艺及质量标准进行了实验研究,旨在为研制成医院新制剂奠定基础。方法:1.提取工艺研究:采用U6*(64)均匀设计试验方法,分别以盐酸小檗碱、黄芩苷和大黄素的提取率为指标,将提取分两组进行,黄连、黄柏为提取组Ⅰ,黄芩、大黄为提取组Ⅱ,优选四黄止痛喷雾剂的最佳提取工艺。2.成型工艺研究:采用单因素考察法,以盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素的转移率及制剂外观为指标,考察了不同的乙醇浓度、不同的增溶剂及用量、不同pH值对成型工艺的影响,优选出四黄止痛喷雾剂成型的最佳工艺参数。3.质量标准研究:采用高效液相色谱法,对处方中黄连、黄柏的盐酸小檗碱、黄芩的黄芩苷、大黄的大黄素的含量进行定量控制;采用薄层色谱法,对处方的黄连、黄柏进行定性鉴别控制;进行系统的方法学考察,为建立该四黄止痛喷雾剂的质量标准奠定基础。4.初步稳定性考察:通过3个月加速稳定性试验、3个月常温稳定性试验,考察四黄止痛喷雾剂的性状、相对密度、有效成分含量等因素的变化程度。成果:通过工艺研究,确定四黄止痛喷雾剂的提取工艺为黄连、黄柏加4倍量的56%乙醇,回流提取3次,每次提取105min;黄芩、大黄加4倍量的67%乙醇,回流提取3次,每次提取105min,合并两组煎液,滤过,静置24h,滤过,减压浓缩为1g·mL-1生药的浓缩液,加入制剂总量0.5%的司盘,加入70%乙醇定容,调pH为7.8～8.2,搅匀,静置过夜,滤过,分装即得。黄连、黄柏药材的薄层定性鉴别,斑点分离效果良好,阴性无干扰,证明所选方法专属性强,高效液相色谱法测定制剂中盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素的含量,进行了系统的方法学考察,试验结果均符合相关要求。根据样品的含量测定结果,制订了盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素的含量限度,暂定本品每毫升含黄连、黄柏以盐酸小檗碱计,不得少于0.13mg,含黄芩以黄芩苷计,不得少于0.25mg,含大黄以大黄素计,不得少于5.73μg。3批样品的初步稳定性试验考察结果表明,四黄止痛喷雾剂经过3个月的稳定性考察,其性状、鉴别、pH、相对密度、装量以及含量测定均符合要求,本品在3个月内基本稳定。结论:本实验研究制订了合理可行的制备工艺路线及方法,并建立了可靠的质量标准检验方法,从而最大限度地保证了四黄止痛喷雾剂的临床疗效。本实验研究方法操作简便,结果准确,重现性好,初步加速稳定性及长期稳定性实验均符合要求,可用于四黄止痛喷雾剂的质量控制,为其申报新药临床批件提供了实验依据。