【摘 要】
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设计并合成了新的半抗原GSH-S-DNP-二苄酯(Hp4),并用HNMR,红外光谱,质谱等手段对其进行了表征.利用戊二醛将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)共价交联,合成全抗原.通过单克隆抗体技
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设计并合成了新的半抗原GSH-S-DNP-二苄酯(Hp4),并用<1>HNMR,红外光谱,质谱等手段对其进行了表征.利用戊二醛将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)共价交联,合成全抗原.通过单克隆抗体技术获得了具有谷胱甘结合能力的细胞株HB4,HB5,HB7.采用硫酸铵分级和ProteinA亲和层析要结合的方法纯化了抗体.用化学突变法将催化基因-SeH引入到抗体的谷胱甘结合部位,制备了三株抗体酶mHB4,mHB5,mHB7,其中mHB5与天然GPX活力具有相同数量级,其酶促动力学机理属乒乓机制,并用紫外光谱法和NBS滴定法研究了硒原子的引入对抗体结构的影响.结合以前几种半抗原的设计,深入分析了半抗原的结构与相应抗体酶活力的关系,阐明了抗体酶的作用机制和结构特点.为进一步研究抗体酶结构与功能的关系,制备高活力的抗体酶提供了实验及理论依据.研究发现三种含硒环糊精具有GPX活力,但无清除HO.的作用.提出了提高含硒环糊精活力的设计建议.抗体酶和含硒环糊精对H<,2>O<,2>损伤的心肌细胞具有一定保护作用.
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