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乙肝病毒表面抗原PreS1（20-47）表位是重要的乙肝病毒（HBV）表位，其识别肝细胞受体，并与HBV侵染人肝细胞有关。高亲和的抗乙肝病毒表面抗原PreS1（20-47）抗体具有封闭HBV的作用。噬菌体展示技术提供了获得结合特异表位抗体的新途径。我们用乙肝病毒表面抗原PreS1（20-47）体外免疫淋巴细胞，构建了抗PreS1（20-47）人源免疫抗体库。所获得的单链抗体的重链属人抗体VH4亚族，轻链属人抗体Vλ4亚族，经检测，确定该单链抗体能与PreS1（20-47）特异结合，其亲合常数在10-7-10-8M范围内，具有潜在的应用价值。 用大肠杆菌和烟草分别表达编码抗乙肝病毒表面抗原PreS1（20-47）表位单链抗体。融合硫氧还蛋白的单链抗体在大肠杆菌BL21（DE3）中以包涵体的形式得到高效表达，单链抗体表达量达占30％的总蛋白以上。经变性复性，用固相金属离子亲和色谱法一步分离纯化了具有功能的单链抗体，在一升的发酵液中得到78mg的重组蛋白。 在用烟草作为生物反应器时，分别将该单链抗体靶向细胞质和内质网。经Western Blot分析，靶向细胞质中表达时，可溶单链抗体最高占总的可溶蛋白的0.06％。而靶向内质网中表达时，表达量达到总可溶蛋白的0.5％。以固相金属离子亲和色谱法，从转基因烟草中一步分离到纯度达90％的具有生物活性的单链抗体，每克叶片组织可获得9μg重组蛋白。 在水培条件下，转基因烟草根可连续分泌具有活性的重组抗乙肝病毒表面抗原PreS1（20-47）单链抗体进入到液体培养液中，不须破坏植物即可连续获得重组单链抗体，为利用植物生物反应器连续生产单链抗体开辟了新途径。