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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性多关节滑膜炎症为主要特征的全身性自身免疫性疾病。RA的病因和发病机制还不十分清楚,目前认为感染因素、遗传因素、T淋巴细胞、B淋巴细胞、滑膜细胞均参与了类风湿关节炎的发病。已有多种动物模型证明B淋巴细胞在自身免疫性关节炎中起了关键的作用,尤其是利妥昔单抗的研发使难治性RA患者的病情得到了明显的改善,越来越多的证据表明B细胞在RA的发病机制中起着重要作用。近年来研究表明B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator ,BlyS)作为一种B淋巴细胞共刺激因子,参与了B细胞的增殖和分化,在体液免疫中亦具有重要的作用,其过量表达可引起自身免疫性疾病,特别是与RA、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)、干燥综合征(Sjogren’s syndrome,SS)发病关系密切。近年的临床研究表明,CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)可能与类风湿关节炎的发生发展有关,然而,对于Treg在类风湿关节炎的发病机制中作用的认识尚不一致,有少数学者认为RA患者外周血表达CD25的B淋巴细胞明显增多,在RA发病机制中起着重要作用,但这方面的报道较少。本实验通过检测RA患者血清及关节液中B淋巴细胞刺激因子的水平及外周血CD19CD25B淋巴细胞的表达,分析其临床意义,以进一步了解RA的发病机制,为RA的治疗提供新的理论依据。方法:选取初治RA患者24例,既往均不曾应用甲氨蝶呤(MTX)、柳氮磺吡啶(SASP)等慢作用抗风湿药及生物制剂。RA患者均符合1987年美国风湿病学会(ARA)类风湿关节炎诊断标准;并取20名健康查体者为对照组。记录RA患者的类风湿因子(RF)、免疫五项、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)及病程、首发症状。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测RA组和健康对照组的血清及RA组的关节液中BlyS的水平。以流式细胞仪(FCM)检测RA患者和健康对照外周血CD19和CD25的表达。RA患者血清及关节液BlyS水平及CD19、CD25百分比与RF、ESR、CRP、PLT进行相关性分析。采用SPSS16.0统计软件进行实验数据处理。所有计量资料数均以(x±s)表示,两组间比较采用两样本均数比较的t检验,相关性检验采用直线相关,P<0.05,则认为差异有统计学意义。结果:1一般资料的描述:RA血清及关节液标本24份,其中女性18例,男性6例,年龄(51.2±15.9)岁;病程(20.1±15.6)月。正常健康对照组20名,其中女性15例,男性5例,年龄(40.2±15.7)岁。两组在性别和年龄构成上差异无显著性。2 RA患者血清BlyS水平为(0.390±0.278)ng/ml,较正常对照组(0.125±0.035)ng/ml明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。3 RA患者关节液组BlyS含量(0.681±0.335)ng/ml明显高于RA患者血清BlyS含量(0.390±0.278)ng/ml,两者具有统计学意义(P<0.05)。4 RA患者血清中BlyS水平与RF具有显著相关性(r=0.710 P<0.01);RA患者血清中BlyS水平与ESR成显著正相关(r=0.541 P<0.01);RA患者血清中BlyS水平与CRP成显著正相关(r=0.681 P<0.01);RA患者血清中BlyS水平与PLT成显著正相关(r=0.603 P<0.01)。5 RA患者外周血中CD25+淋巴细胞百分数为(8.814±2.034) %显著高于正常对照组(3.233±0.800)%差异具有统计学意义(P<0.01);CD19+淋巴细胞百分数为(10.236±2.212)%高于正常对照组(6.870±1.052)%;差异具有统计学意义(P<0.05);CD19+CD25+(0.500±0.259)%较正常对照组(0.168±0.482)%高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1 RA患者血清及关节液中B淋巴细胞刺激因子明显增高,说明BlyS在RA的发病过程起一定作用。2 RA患者关节液中存在高水平的BlyS,且高于血清水平,说明BlyS在引起关节局部炎症过程起重要作用,与RA的关节滑膜病变和骨质破坏发生密切相关。3 RA患者血清中BlyS水平明显升高,并与RF、ESR、CRP、PLT呈正相关,说明BlyS与RA的病情活动关系密切,可为RA的病情监测提供一定的参考。4 RA患者外周血CD25+、CD19+、CD19+ CD25+B细胞亚群百分比明显高于正常。5本文通过对RA患者血清及关节液中B淋巴细胞刺激因子及外周血B细胞亚群异常的检测,有望为应用生物制剂治疗RA以及新药的开发提供一定理论依据。