DNA的荧光测定及碱基的电化学行为

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DNA是遗传信息的承担者和基因表达的基础,具有储存和传递信息的功能。核酸序列的快速检测在环境监测、食品分析、法医学等领域必不可少,发展准确的检测DNA浓度与序列的方法和微型化的分析仪器是当前分析化学与分子生物学、肿瘤学和临床医学等学科共同关心的课题。自从发现核酸的电化学活性以来,DNA及其内部基团电化学行为的研究已引起足够重视。基于以上情况,本论文工作先合成了牛磺酸缩水杨醛席夫碱铜配合物,采用光谱方法和电化学方法分别探讨了所获得的配合物与DNA分子之间的相互作用。利用有DNA存在能引起配合物的荧光性质变化,建立了一种对DNA进行定量测定的方法。为了进一步探讨组成DNA分子的嘌呤碱基性质,使用电化学方法,结合纳米材料制备的修饰电极能提高测定的选择性和灵敏性的特点,对组成DNA分子的嘌呤结构单元以及DNA受损后氧化产物的定量测定进行了考察。全文共分为四章:(1)首先对脱氧核糖核酸(DNA)的组成及其内部碱基结构单元的性质进行了简单的论述,然后综述了近年来修饰电极的制备、分类和应用以及纳米铜氧化物材料的性能和应用,最后提出了论文设想。(2)以牛磺酸缩水杨醛席夫碱为配体,合成了铜希夫碱配合物Cu(TSSB)22+,采用紫外吸收光谱法、荧光分光光度法以及伏安法研究了Cu(TSSB)22+配合物与DNA的相互作用,通过探讨氧化还原过程中一价配合物、二价配合物与DNA的键合常数之比(k+/k2+)以及Cu(TSSB)22+配合物与热变性DNA作用性质,推测作用方式主要为静电引力。利用DNA与Cu(TSSB)22+配合物作用使体系的荧光强度提高的性质,建立了一种测定DNA的方法。(3)制备了纳米氧化铜巯基乙胺修饰的玻碳电极,在此电极上采用循环伏安法和示差脉冲伏安法研究了8-羟基-2’-脱氧鸟嘌呤(8-OH-dG)的电化学行为,得到较低的检出限和较宽的线性范围,并对8-OH-dG进行了模拟实样的测定。(4)利用电沉积方法制备了纳米铜氧化物修饰玻碳电极,探讨了在此修饰电极上鸟嘌呤和腺嘌呤同时的电化学行为,发现电化学响应信号在此电极上比裸电极上灵敏度高,并使用该修饰电极同时测定鸟嘌呤和腺嘌呤。
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