论文部分内容阅读
目的:探讨CD24、ALCAM在大肠癌中的表达及其与细胞增殖、血管生成的关系。方法:运用流式细胞术直接免疫荧光法和免疫组织化学方法检测66例大肠癌肿瘤组织及相应正常大肠粘膜CD24、ALCAM的表达量。CD24、ALCAM蛋白表达量以阳性率(percentage of positive cells,PPC)和平均荧光强度MFI值(mean fluorescence index)表示。运用免疫组织化学法检测肿瘤组织CD34、PCNA的表达情况,根据CD34的染色情况计算出大肠癌组织的微血管密度(microvessel density),根据PCNA染色情况计算出肿瘤细胞PCNA标记指数。结果:(一):CD24与大肠癌侵袭和转移的关系1.流式细胞术直接免疫荧光法1.1大肠癌肿瘤组织CD24阳性率90.40%(75.10%~96.35%)明显高于相应的癌旁组织36.15%(32.00%~53.28%),X~2=6.877,P<0.001。大肠癌肿瘤组织CD24蛋白MFI值18.10(11.45~25.43),明显高于正常粘膜组织8.41(5.59~10.33),X~2=6.934,P<0.001。1.2浸润型、高Dukes分期、高pTNM分期及有淋巴结转移的癌组织中CD24蛋白的平均荧光强度显著高于对应组(P<0.05)。浸润型、低分化、高Dukes分期、高pTNM分期及有淋巴结转移的癌组织中CD24蛋白阳性百分率显著高于对应组(P<0.05)。1.3在CD24阳性表达病例中,PCNA的表达随着CD24表达强度的升高而升高(P<0.05)。1.4大肠腺癌肿瘤细胞CD24阳性表达率与MVD呈正相关(r=0.243,P=0.050)。而CD24蛋白平均荧光强度与MVD未见明显相关(r=0.115,P=0.358)。2.免疫组织化学结果2.1免疫组化染色显示CD24定位于细胞膜,部分细胞胞浆亦染色,呈棕黄色颗粒状染色。正常大肠粘膜CD24绝大部分呈阴性染色,超过75%的大肠癌细胞有不同程度的CD24染色。44%的肿瘤呈中等强度表达,26%的肿瘤呈强阳性表达。2.2高Dukes分期、高pTNM分期及有淋巴结转移、浆膜外浸润的癌组织中CD24蛋白染色强度显著高于对应组(P<0.01)。而与大肠癌患者的性别、年龄、病理分级无关。2.3在CD24阳性表达病例中,PCNA的表达随着CD24表达强度的升高而升高(P<0.05)。2.4大肠癌CD24蛋白表达强度与大肠癌微血管密度显著相关(r=0.228,P=0.019)。(二):ALCAM与大肠癌侵袭和转移的关系1.流式细胞术直接免疫荧光法结果1.1大肠癌肿瘤组织ALCAM阳性率48.20±20.68,明显高于癌旁粘膜组织10.58±2.03,肿瘤组织平均荧光强度MFI(10.05±4.47)明显高于癌旁粘膜(4.56±2.10)(t=9.832,P<0.001)。1.2 ALCAM的表达增强与大肠癌的Dukes分期、pTNM分期、淋巴结转移呈正相关。1.3随着ALCAM表达增强,细胞增殖指数也随之升高(P<0.05)。1.4大肠腺癌ALCAM蛋白平均荧光强度与MVD呈正相关(r=0.267,P<0.05)。而ALCAM蛋白肿瘤细胞阳性表达率与MVD未见明显相关(r=0.234,P=0.059)。2.免疫组织化学结果2.1免疫组化染色显示ALCAM定位于细胞膜,部分细胞胞浆亦染色,呈棕黄色颗粒状染色。正常大肠粘膜ALCAM呈阴性染色。68%的大肠癌细胞有不同程度的ALCAM染色。32%的肿瘤组织呈阴性染色。2.2 ALCAM表达与浸润深度、pTNM分期,淋巴结转移明显正相关。2.3大肠癌ALCAM蛋白质表达与大肠癌细胞增殖指数显著正相关。2.4大肠癌ALCAM蛋白质表达与MVD无关(t=1.40,P=0.17)。(三) CD24、ALCAM/CD166的相关性1.流式细胞术直接免疫荧光法肿瘤组织CD24阳性百分率和ALCAM阳性率呈显著正相关(r=0.462,P<0.001)。大肠腺癌CD24蛋白平均荧光强度与ALCAM蛋白平均荧光强度呈显著正相关(r=0.411,p=0.001)2.免疫组织化学肿瘤组织CD24表达和ALCAM表达呈正相关(r=0.262,P<0.05)结论:1.CD24在大肠腺癌中表达水平明显上调,并与肿瘤细胞增殖密切相关,并可能与肿瘤性血管生成有关。提示CD24可能在大肠癌发生发展中起重要作用。2.ALCAM在大肠腺癌中表达水平明显上调,并与肿瘤细胞增殖密切相关,并可能与肿瘤性血管生成有关。提示CD24可能在大肠癌发生发展中起重要作用。3.大肠腺癌CD24表达和ALCAM表达呈正相关