大戟科四种药用植物内生真菌资源及其与宿主相互关系研究

来源 :中国药科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kyunlong
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为了保护和开发大戟科药用植物资源,对大戟科四种药用植物内生真菌资源以及和宿主相互关系进行研究.对大戟科四种药用植物内生真菌进行分离鉴定,结果表明四种植物均含有内生真菌.对大戟组培幼苗形成条件进行探讨,MS培养基,蔗糖30g/L,琼脂10g/L,6-BA含量1-3mg/L,NAA0.2-0.5mg/L的激素组合有利于形成嫩芽,在最佳条件下,可以有55﹪形成嫩芽.6-BA含量2mg/L,NAA0.4mg/L激素组合形成愈伤比例最大,生长最好.在6-BA2mg/L,NAA0.1mg/L培养基上有12﹪茎芽(含腋芽)来源的愈伤形成了芽.在1/2MS无激素培养基中,有47.1﹪的芽形成根.用获得的组织培养悉生苗和内生菌共培养,结果表明,E4、E5、B3、B6处理组存活率和生长量均大于对照,S12处理组低于对照.这说明E4、E5、B3、B6对京大戟幼苗生长是有利的.用MS液体培养基,6-BA2mg/L,NAA0.4mg/L,培养获得大戟悬浮细胞系.其悬浮细胞在21天产量达到最大,为10.82g/L..添加E5提取物和发酵液均可以促进其细胞生长.当20ml发酵液中加入157μl提取物时,可以获得增长,比对照高34.13﹪.用提取物代替组织培养细胞中的生长素、细胞分裂素和有机成分,发现,代替生长素成分恢复效果最好,达到对照的97.92﹪.检测添加真菌提取物的生理指标发现,其SOD酶活力大于对照,POD酶活力低于对照.脂肪酸组分和对照相近.比较悬浮细胞乙醇浸出物5种主要组分含量发现,真菌提取物添加,改变各组分含量和产量,有的提高,有的降低.用毛细管电泳检测出组织细胞中含有大戟醇、24亚甲基环阿尔廷醇和β-谷甾醇.大戟科四种植物43株内生菌有11株有抑菌活性,占总菌数的25.58﹪,有12株有不稳定的抑菌活性,占27.91﹪.有稳定抑菌活性的菌株分布在交莲孢属、镰刀菌属、壳小圆孢属、毛壳菌属、拟茎点霉属和小穴壳属中.对于36株内生菌进行研究表明,有34株可以在纤维平板上生长,占94.44﹪;24株可以在木质素平板上生长,占61.11﹪.检测其漆酶、多酚氧化酶、纤维素酶活力表明,酶活力高低和分离部位以及宿主植物是木本植物还是草本植物有关.大戟科四种植物和其内生菌脂肪酸和宿主脂肪酸组分差异较大,宿主植物含有较高的18:3(α-),而内生菌中该脂肪酸含量极低,内生菌脂肪酸不饱和指数低于植物脂肪酸不饱和指数.内生菌生长培养条件的影响,在不良培养条件下生物量降低,脂肪酸不饱和指数增加.
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