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本文从土壤和实验室保藏菌株中筛选得到一株橙皮苷酶高产菌株Aspergillus niger WZ001，通过固态发酵制备橙皮苷酶，以橙皮苷作为底物，对其酶转化产物进行分析鉴定，得到两种酶解产物，它们分别是橙皮素单糖苷和橙皮素。利用两次硫铵沉淀、HiprepTM 16／10 Phenyl疏水层析、HiprepTM Q离子交换、SuperdexTM G75凝胶过滤等方法将橙皮苷酶进行分离纯化，得电泳级α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶，α-L-鼠李糖苷酶纯化倍数为24.3倍，酶活回收率为9.0％，分子量约66kDa；β-D-葡萄糖苷酶纯化倍数为倍28.0倍，酶活回收率为9.9％，分子量约97kDa。由实验结果可知橙皮苷酶是一个由α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶组成的酶系，首先由α-L-鼠李糖苷酶作用于橙皮苷，将其转化为橙皮素单糖苷，而后由β-D-葡萄糖苷酶将橙皮素单糖苷进一步转化为橙皮素。Aspergillus niger WZ001能够同时产生两种不同的α-L-鼠李糖苷酶，一种能够作用于橙皮苷的α-1，6-鼠李糖苷键，另一个可作用于柚皮苷的β-D-葡萄糖苷键。本文对分离纯化后的α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶进行了酶学性质和反应动力学的研究。α-L-鼠李糖苷酶的最适pH和最适温度分别为4.0和60℃，该酶在温度低于50℃、pH2.0-10.0的范围内比较稳定，米氏常数Km=6.7mmol／L。β-D-葡萄糖苷酶的最适pH和最适温度分别为4.0和60℃，该酶在温度低于40℃、pH2.0-9.0的范围内比较稳定，米氏常数Km=1.75mmol／L。利用大孔吸附树脂A对橙皮素单糖苷和橙皮素进行分离纯化。以30％乙醇溶液、流速2mL／min的条件洗脱时，能够使橙皮素单糖苷和橙皮素实现较好的分离，得到橙皮素单糖苷和橙皮素的纯度分别为95％和96.3％。