玉米素核苷单克隆抗体的制备及小麦与白粉病互作初期激素作用的分析

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植物在受到病原菌侵袭感病后常常伴随着病斑、枯斑、叶片黄化、坏死和脱落等症状。分子病理学和生理学研究确认了植物激素在病原物与植物互作中的重要作用。因此,分析激素类物质在特定症状中的作用是研究亲和或不亲和互作中信号转导和抗、感病机制等的一条重要途径。 为了分析CTKs在小麦与白粉病菌互作过程中的变化,首先制备了抗t-ZR的单克隆抗体。该抗体能专一识别t-ZR,与DHZR的交叉反应率为53.06%,和其他类似物的交叉反应率则相对较低。利用该抗体建立了定量测定t-ZR的直接ELISA,其检测范围为0.051—12.5pmol/50μl;标准曲线的相关系数在0.99以上;灵敏度为6.3fmol;板内误差小于2.47%,板间误差小于3.4%。这种基于单克隆抗体的t-ZR ELISA具有高度灵敏特征,适用于快速、高效、精确地定量分析植物样品中t-ZR水平。 杂交瘤细胞t-ZR4-D1经继代培养、冻存5个月复苏后,分泌抗t-ZR单克隆抗体的能力还保持稳定。 小麦(苏三)接种白粉病菌,黑暗培养8天后形成典型的绿岛现象,即感染部位的衰老被显著延缓。这种小麦—白粉病菌互作引起的衰老延迟现象长期来是病理生理中典型的研究模式。 本文拟分析白粉病菌侵染初期小麦叶片中激素水平的变化来阐述这一模式中植物激素的作用 接种白粉病菌后,小麦叶片在1—72h内t-ZR和iPAs含量明显升高,处理后2d左右t-ZR值到达1154.4pmol/g.FW,是对照的近5倍,且t-ZR与iPAs的总和在感染初期一直维持较高水平。揭示CTK的增加可能有利于病菌在寄主上的生长和定殖、也可能是有利于寄主传递激活抵抗病菌侵染的信号。 GA?含量在感染初期升高较快,12h后稍有下降并维持较高水平,为对照的1.3倍左右:ABA含量出现先迅速升高,后回落到对照水平的现象。说明GA?和ABA可能在互作初期起信号因子作用,GA?有可能协同CTK延缓叶片的衰老。IAA含量几乎没卜米奈核臼中兑降{)’].体的;IjlJ爷及小奄’jl’l粉炳勺作刊明微索{’I川的分析有变化,推测I‘/在互作初期起关健作用的可能性不大
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