论文部分内容阅读
根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类世界上分布广、种类多、寄主范围广的植物固着内寄生线虫,是威胁蔬菜生产的主要病原物之一。本研究对深圳市主要蔬菜生产基地的根结线虫种类进行了调查和鉴定,同时改进了单条根结线虫提取DNA方法,提高了PCR成功扩增率;在GPS定点采样基础上,对深圳市主要蔬菜生产基地的根结线虫数量动态进行监测,并结合温室盆栽轮作试验,研究不同种植模式对根结线虫数量动态的影响。主要研究结果如下: 1、采自于深圳市13个蔬菜生产基地的121个采样点的蔬菜根和根围土壤样品中,有11个蔬菜生产基地的74个采样点发现根结线虫,蔬菜根结线虫发生率为61.16%;从中共纯化得到77个根结线虫种群,运用比较形态学方法、并结合同功酶和分子生物学方法,鉴定出5种根结线虫。其中69个种群鉴定为南方根结线虫(Meloidogyneincognita);3个种群鉴定为爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica);1个种群鉴定为花生根结线虫(Meloidogyne arenaria);3个种群鉴定为象耳豆根结线虫(Meloidogyneenterolobii);1个种群鉴定为拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)。同时发现2个采样点为南方根结线虫(M.incognita)和象耳豆根结线虫(M.enterolobii)的复合种群,1个采样点为南方根结线虫(M.incognita)和拟禾本科根结线虫(M.graminicola)的复合种群。可见根结线虫病在深圳市主要蔬菜生产基地分布广泛,南方根结线虫是威胁深圳市蔬菜生产的明显优势种类。 2、利用1号昆虫针直接将单条根结线虫或单卵在PCR管中刺破,以此为模板,同时利用引物#C2F3和#1108在高扩增效率DNA聚合酶(KOD FX)的作用下,扩增根结线虫mtDNA的COII和LrRNA基因间目的DNA片段,成功率达100%。该方法操作简单、成功率高、用时短、所用试剂少、对后续试验无影响,具有应用推广价值。 3、揭示了不同栽培模式对土壤根结线虫种群数量动态的影响,证实了合理的轮作能有效抑制土壤根结线虫数量和控制蔬菜根结线虫病的发生,并且其效果显著好于感病蔬菜连作应用药剂的防控,建立了防控蔬菜根结线虫病的不同轮作栽培模式,并明确了这些模式的防控效果。 本研究明确了深圳蔬菜根结线虫的种类、分布和发生特点及其优势种群;明确了栽培模式对土壤根结线虫种群数量动态的影响,以及其对防治根结线虫病的效果;改进了单条线虫DNA的提取方法,为科学制定深圳蔬菜根结线虫病的防控措施,为根结线虫的快速检测鉴定,为充分利用轮作措施防治蔬菜根结线虫病提供了科学依据和方法。