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黄蜀葵花总黄酮（Total flavone of Abelmoschl Manihot L medic，TFA）是锦葵科秋葵属植物黄蜀葵的花中提取的有效部位。本室以前的研究初步表明灌胃（intragastric administration，ig）给予TFA对心肌缺血可能有一定的保护作用，但未做系统研究。众所周知，黄酮类化合物口服给药生物利用度较低，影响其药效的发挥，因此，本研究采用静脉注射（intravenous injection，iv）给予TFA的方法，对TFA保护缺血性心肌损伤的作用进行了进一步研究，并重点对TFA药理性预适应（pharmacological preconditioning，PP）作用及其机制进行了较深入探讨，结果如下： 1．TFA延长夹闭气管心肌缺氧小鼠心电消失的时间 采用夹闭气管致小鼠心肌缺氧的模型，观察小鼠尾静脉注射（iv）不同剂量TFA对其心电消失时间的影响。结果发现TFA 32,16,8 mg·kg-13个剂量组均可使夹闭气管后小鼠心电消失的时间较NS对照组明显延长，最多延长37.88％，差异具有显著性。 2．TFA减轻异丙肾上腺素（Isoproterenol，Iso）诱发的小鼠急性心肌缺血性损伤 连续皮下注射（subcutaneous injection，sc）Iso，可导致小鼠出现急性心肌缺血，并产生典型的缺血心电图（electrocardiogram，ECG）波形。本实验在每次sc Iso前10min尾静脉注射（iv）不同剂量的TFA，连续3天，每天1次，并于第3天注射Iso后立即记录ECG，20min后处死小鼠，迅速取其完整心肌组织，称心肌湿重；110℃干烤8小时后，再称其干重。计算心肌含水量（Myocardial water content，MWC）及心肌指数（Myocardial Index，MI）。结果发现，模型组小鼠MWC较NS安徽医科大学博士学位论文对照组增加1.96%，Ml升高27.04%。TFA 16mg.kg一‘可明显抑制模型组小鼠Mwc的增高，抑制率为65.82%，TEA犯，16 mg·kg一，组对模型组小鼠Ml的升高的抑制率则分别达47，48%和65.82%，差异具有显著性。对模型组小鼠ECG ST段和T波的异常改变，TFA的改善作用显著。 3.TFA减轻离体大鼠心肌缺血再灌注损伤（i schemiarePerfusioninjury，I班） 采用Langendorff离体心脏灌流法建立离体大鼠心肌缺血缺氧再灌注模型，观察到T队100，50，25 mg·L’‘可明显增加缺血再灌注（isehemia:eper九sion，xR）离体大鼠心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶（s即eroxide dismutase，SOD）的活力，显著降低丙二醛（malondialdehyde，MDA）生成量，明显减少心肌细胞内乳酸脱氢酶（laetate de抑drogenase，LDH）的漏出;T队100，50 mg·L‘’可明显减少心肌细胞内肌酸磷酸激酶（ereatine phosphokinase，CpK）的漏出;此外，TFA可明显升高心肌组织中一氧化氮合酶（nitrieoxide synthase，Nos）的活力（2 00，25 mg·L一’剂量组）和心肌组织中一氧化氮（nitric。xide，No）含量（一00 mg·L一，剂量组）。 4.TFA增加犬冠脉血流量 采用电磁流量计测定犬冠状动脉左旋支（Left eireumflex braneh of eoronary，LcX）血流量的方法，观察iv TFA对犬Lcx血流量的影响。结果发现，16mg .kg一，TFA在给药后IOmin时，犬LCX的血流量出现显著增高，并一直持续至25min。 5.T队药理性预适应（Pharmacologieal preeonditioning with TFA，TFA一pp）改善家兔心肌IRI 家兔持续静脉推注（smin）不同剂量T队（16，s，4 mg·kg一，），停用10min，再进行IR以模拟缺血预适应（ischemic preeonditioning，Ip）的实验方法，观察家兔LCX经结扎、再灌后，其ECG心律失常发生率、ECGll导联ST段、T波及生化指标的变化情况。结果发现TFA16，8，4 mg·kg一‘对单纯IR组家兔出现的异常EcG改变（ST段抬高、T波高耸等）有较好的改善作用，同时明显降低了心律失常的发生率。生化指标测定结果显示TFA16，8，4 mg·kg一’组不同程度抑制了心肌细胞内乳酸（Lactic Acid，LD）的生成量和LDH的漏出;显著升高血浆中SOD及谷安徽医科大学博士学位论文肤甘肤过氧物酶（glutatnione peroxidase，osH一Px）的活力、明显减少MDA的生成;对血浆中NOS活力的增加和NO生成亦可产生不同程度的促进作用，与IP保护效应相似。 6.T队一PP上调细胞凋亡相关基因bel一2信使核糖核酸（messenger ribonucleic-acid，mRNA）、下调P53 n1RNA的表达 在家兔IP模型上，实验结束时通过采集心肌组织标本，应用原位杂交（ in situhybridization，ISH）分子病理学实验技术检测细胞凋亡相关基因bel一2 mRNA及P53 mRNA的表达情况。结果发现，IR组家兔心肌组织中P53 mRNA分布密度显著增高，呈阳性表达，bel一2 mRNA的表达与之相反。IP组家兔，经短暂缺血预处理后，P53 mRNA分布密度明显降低，表达水平下调;不同剂量的TFA预处理结果与xP组相似，也明显下调P53m胭A的表达（16，8，4 mg·kg一，），同时上调bel一2mRNA的表达水平。 7.TFA一PP下调细胞间粘附分子（intereellular adhesion moleeule一l，ICAM一1）mRNA的表达 同上模型，采用ISH分子病理学实验技术检测心肌ICAM一1 mRNA的表达情况。结果发现，IR组家兔心肌组织中ICAM一1基因mRNA分布密度显著增高，呈阳性表达，而TFA16，8，4mg’k梦3个剂量组经预处理后，显著下调了ICAM一1mRNA?