【摘 要】
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目的：1.研究高糖对人腹膜间皮细胞（HPMCs）间粘合连接复合体及整合素表达的影响,探讨腹膜透析中腹膜间皮细胞层完整性损伤的机制;2.探讨腹膜透析透出液中表皮生长因子（EGF）表达及意
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目的：1.研究高糖对人腹膜间皮细胞（HPMCs）间粘合连接复合体及整合素表达的影响,探讨腹膜透析中腹膜间皮细胞层完整性损伤的机制;2.探讨腹膜透析透出液中表皮生长因子（EGF）表达及意义;3.体外研究EGF在HPMCs损伤修复中的作用和机制.方法：1.采用半定量逆转录聚合酶链反应、Westernblot及免疫荧光等方法检测HPMCs粘合连接复合体主要成分钙粘附分子-E-Cadherin、连环蛋白β-Catenin基因及蛋白水平表达,用流式细胞仪检测其整合素表达,采用免疫荧光技术观察高糖对细胞肌动蛋白微丝骨架的影响;2.用ELISA法检测16例腹透患者透出液及血清中EGF的表达;3.<3>H胸腺嘧啶核苷掺入法、细胞计数法及流式细胞术检测EGF对HPMCs增殖、移行及粘附的影响;4.相关显微镜观察细胞形态学变化,免疫组化观察细胞角蛋白、波形蛋白、成纤维细胞特异性蛋白-1的表达,ELISA检测Ⅰ型胶原的水平,以探讨EGF对HPMCs表型转化的影响.结论：1.高糖使HPMCs损害细胞间粘合连接复合体的形成,减低细胞整合素表达,并使微丝骨架解体,导致腹膜间皮完整性的损害;2.腹透透出液中EGF均为循环转运至腹腔的结果,缺乏腹腔内局部自分泌及旁分泌机制,这可能是腹膜间皮损伤后修复不全的重要原因;3.EGF明显促进HPMCs的损伤后修复,并且未造成其细胞表型改变,因此EGF可能作为腹透中的一个保护及修复因子应用于临床.
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