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目的:通过研究低氧诱导因子-1α (Hypoxia inducing factor-1α)在铜绿假单胞菌肺炎模型小鼠肺组织中的表达情况,以及探讨HIF-1α与TNF-α、IL-8之间的相关性,推测HIF-1α在铜绿假单胞菌肺炎中的可能作用,以期为铜绿假单胞菌肺炎的治疗寻找到新思路。方法:1.将鼠龄6~8周、体重25~30g的清洁级健康雄性昆明小鼠120只按随机原则分成肺部感染组(PA组:60只)和正常对照组(生理盐水组:60只)。PA组:氯胺酮麻醉小鼠后固定,常规消毒铺巾,严格无菌操作,切开颈部皮肤,钝性分离至皮下组织,暴露上段气管,经气管内穿刺注入铜绿假单胞菌(PA)菌液(2个麦氏单位浓度、0.03ml)建立小鼠铜绿假单胞菌肺炎模型;正常对照组:操作同PA组,经气管内穿刺注入无菌生理盐水(0.03ml)作为对照,两组均于造模成功后第3、9、24小时随机分别抽取20只小鼠,予以留取标本后处死。2.收集各组不同时间点处死的小鼠血液,离心分离血清后,以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)检测血清中TNF-α、IL-8的浓度;取右肺经10%多聚甲醛固定后,切片行HE染色比较炎症的范围及程度,并行免疫组化染色检测肺组织中HIF-1α蛋白的表达水平;同时留取左侧肺组织行肺组织匀浆细菌培养及菌落计数。3.应用SPSS17.0软件对数据进行统计分析。结果:1、PA感染组小鼠肺组织病理改变在24小时最为严重,炎症范围广,程度重,3、9小时与之相比均较轻,但均有明显的炎症改变;而对照组的肺泡及肺间质结构基本正常,无明显出血及炎细胞浸润。并且PA感染组3、9、24小时肺组织匀浆均培养出铜绿假单胞菌,菌落计数均>105CFU/g,而对照组肺组织匀浆各时间点均未培养出细菌。2、PA感染组3、9、24小时小鼠肺组织中HIF-1α蛋白的表达均有明显的增高,其中细菌接种3小时后HIF-1α的表达就有升高,9小时继续升高,24小时最高。而对照组HIF-1α各时间点均未见明显表达。3、PA感染组3、9、24小时小鼠血清中TNF-α、IL-8的水平较对照组均有明显的增高,差异有统计学意义(P<0.05)。其中TNF-α、IL-8的水平均在3小时开始上升,9小时继续升高,24小时最高。4、HIF-1α蛋白的表达与TNF-α、IL-8的浓度呈正相关(相关系数分别为0.827和0.974)。结论:1. HIF-1α参与了铜绿假单胞菌肺炎的炎症过程,且炎症愈重表达愈明显。2. HIF-1α是炎症细胞因子网络中的重要一环,它与TNF-α、IL-8等相互作用,促进炎症细胞合成及释放多种炎症因子,在铜绿假单胞菌肺炎的发生发展中起了重要作用。