花生花针期生长素的运输与分布及相关基因表达分析

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:savage10000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
花生(Arachis hypogaea L.)是植物王国里独有的地上开花、地下结果的植物。一般认为,下针和结荚过程受植物激素调控。本研究以花生为材料,通过外施IAA及其运输抑制剂,对花生开花下针期植物激素的含量与分布、生长素结合蛋白基因ABPl和生长素输出蛋白基因PIN1的克隆与表达以及花生的再生体系进行了研究,有望为解析花生开花下针期的生长调控及生理现象提供一定理论基础。主要研究结果如下:1、建立了一种基于固相萃取同时提取纯化游离态IAA和部分结合态IAA的LC-MS检测方法,并对花生不同组织中IAA及IAA-Ile含量进行了测定。花生根、茎、叶、花、果针中IAA和IAA-Ile含量均在盛花期最高,饱果成熟期最低。IAA和IAA-Ile含量在果针中最高,叶片次之,花中最低。外施IAA后,各组织中IAA和IAA-Ile含量均增加。其中,叶片中IAA含量增加显著,而IAA-Ile则先降低再增加。外施生长素输入抑制剂CHPAA,茎和叶中IAA含量升高,IAA-Ile含量则下降;根和果针中IAA含量降低,IAA-Ile含量在根中先升后下降,果针中降低;花中IAA和IAA-Ile含量变化不明显。外施生长素输出抑制剂TIBA,叶和茎中IAA含量增加,IAA-Ile含量下降;根和果针中IAA和IAA-Ile含量均降低;花中IAA和IAA-Ile含量变化不明显。花生茎和叶中IAA含量与IAA-Ile含量显著正相关。外施IAA及其运输抑制剂后,盛花期根和果针的IAA含量和IAA-Ile含量高度正相关。2、建立了以石油醚萃取过柱法提取纯化茉莉酸的LC-MS方法,并对花生不同生长时期的JA、Z、ZR及ABA含量和分布进行了研究。JA含量在盛花期和初花期较高,但果针中以结荚期最高;ABA含量在饱果成熟期最高,在幼苗期、初花期及盛花期的含量都较低;Z含量在初花期和盛花期较高,在饱果成熟期较低;ZR含量在各生长时期的变化不大,但各时期均以果针中的含量最高。外施不同浓度IAA后,花生根、茎和叶中JA均升高;根中ABA变化不明显,茎和果针中ABA含量降低,叶片中ABA含量上升;Z在根、茎、叶的含量呈降低趋势,果针中增加;ZR在根中变化不明显,茎中先降低后增加,叶片和果针中先增加后再降低。CHPAA处理后,茎和叶中JA含量先增加后降低,而根部JA含量则明显增加,并在浓度10μM时最高;TIBA处理使茎和叶中JA含量降低,根中则明显增加,并在浓度10μM时最高。NPA处理使根、叶、果针中的ABA含量先降低后增加,茎中则呈上升趋势;根、茎、叶、果针中Z含量先降低后升高;茎和叶中ZR含量则先升高后降低,根中ZR含量在浓度10μM时最高,而ZR在果针中的含量则先降低后增加。3、得到全长635 bp,共编码198个氨基酸的花生ABP1基因,将其命名为AhABPl, GenBank登录号为FJ360751。同源性分析表明核苷酸序列与拟南芥等植物ABP1基因具有较高同源性,均达到70%以上;氨基酸水平上与拟南芥等植物ABP1氨基酸序列一致性均在70%以上,相似性在75%以上。ABP1在花生盛花期根、茎、叶中均有表达,叶片中表达最高,根中表达极少;外施IAA8h时ABP1相对表达量最高;TIBA处理使ABP1表达低于对照;CHPAA处理4h和8h后表达减少,处理12h表达高于对照。4、PIN1在花生根、茎、叶、果针中均有表达,根中表达最高,叶片表达最少。在盛花期根部表达最高,初花期最弱。浓度为10μM的IAA处理使PIN1在根部的表达最强,而CHPAA及TIBA处理后表达均低于对照。相关分析表明:IAA及其运输抑制剂处理使PIN1在在果针和叶中显著相关。5、以花生茎尖为外植体,在MS+1.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA培养基上可以获得较多的愈伤组织和丛生芽;在MS+0.5mg/LBA+0.2mg/LNAA培养基上可以获得较好的茎尖增殖培养;在MS+2.0 mg/L NAA+0.2 mg/L BA培养基上可以得到生根较好的再生植株。
其他文献
<正>发现起点是困难的,或者毋宁说:从起点开始是如此困难。——维特根斯坦~①引言刑事司法的正义在于准确认定案件事实和正确适用法律,而事实认定又是适用法律的前提,故一个"
会议
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,也是单子叶植物发育分子生物学研究的理想模式植物。水稻花器官的结构明显不同于双子叶植物,正常水稻的小花从外到内依次由1个外颖、1个内
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
分析了我国鳖龟种质资源现状,并针对当前现状提出鳖龟良种的培育措施,以期为鳖龟新品种(系)的选育提供指导。
斜纹夜蛾是一种农作物害虫,主要集中发生于江西、江苏、湖南、安徽、河北、山东等地,危害寄主范围广泛。其中,受害的作物有粮食、菠菜、瓜、豆类等100科、300多种植物,严重威
<正>后现代创作范式,其实是一种由世界范围内普遍泛起的后工业化时代所造就的较为激进的创作思潮,纵观近半个世纪以来的影视创作,后现代主义以其为创意所提供的无限可能,构建
选择1日龄的黄羽铁脚麻公雏1 000只,随机分为4组,各组日粮营养含量相近,其中"油研10号"菜籽饼分别占日粮的比例为0(对照组)、5%、10%、15%,进行为期35 d的饲养试验。结果表明
目前我国家具行业已实现了经济快速增长.本文通过家具标准体系框架、重点标准研制和国际标准化等方面的研究,提出了我国家具标准体系战略,建成结构合理、衔接配套、覆盖全面,
<正>天王补心丹出自《摄生秘剖》,由酸枣仁、柏子仁、麦冬、天冬、瓦味子、党参、当归、生地黄、玄参、丹参、茯苓、炙远志、桔梗组成,具有滋阴清热,养血安神之功效,主治阴虚