论文部分内容阅读
作为免疫系统中最重要的抗原递呈细胞,树突状细胞起到起始适应性免疫应答并连接固有免疫应及适应性免疫应答的作用。树突状细胞的成熟和活化,需要多个信号通路和转录因子的协调,目前发现和报道的大部分研究集中于树突状细胞成熟和分化的正向调控。我们实验室前期研究观察到E2F1负调控树突状细胞成熟,提示了一个树突状细胞可能的反馈调节通路。为此,该研究拟深入探讨和揭示E2F1反馈调节树突状细胞成熟和分化的可能分子机制。
SRC3是细胞代谢中重要的共激活因子,以往曾有报导SRC3是E2F1的调控基因。另外报导还发现,SRC3敲除小鼠中淋巴瘤发病率提高,提示其可能参与免疫细胞的成熟以及分化。
本研究中,在对敲低E2F1的DC2.4细胞中检测发现,SRC3的表达水平下调;而在E2F1过表达细胞中,SRC3的表达水平也随着E2F1的高表达上调。上述实验结果提示SRC3可能是E2F1的靶基因。深入研究进一步发现,改变SRC3表达时,引起了包括AKT及p38等多条与树突状细胞成熟相关的信号通路的变化,同时部分树突状细胞表面受体也发生了显著的变化。实验结果提示E2F1可能通过转录调节SRC3,负调控树突状细胞成熟。为进一步揭示转录因子E2F1对SRC3的转录调控机制,对SRC3启动子序列进行分析,发现其中含有多个E2F1和Sp1潜在靶位点。在DC2.4细胞中敲低Sp1,检测证实Sp1可负调控SRC3。目前已构建了含有SRC3启动子序列上游-600-+58片度的报告基因质粒以及一系列截短质粒,细致地研究E2F1在转录水平上调控SRC3的分子机制正在进行。
本文证实了在DC2.4细胞中,E2F1可能通过转录调控SRC3表达。发现在树突状细胞成熟过程中SRC3瞬时下调以及SRC3表达水平的改变调控了多条信号通路,提示SRC3可能在树突状细胞成熟过程中可能扮演着一定角色。