【摘 要】
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目的:通过体外实验和动物模型观察OPN-siRNA对喉鳞癌的治疗效应,探索一条喉鳞癌基因治疗的新途径。方法:OPN基因被OPN-siRNA沉默后,RT-PCR检测OPNmRNA的表达水平;Western-blo
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目的:通过体外实验和动物模型观察OPN-siRNA对喉鳞癌的治疗效应,探索一条喉鳞癌基因治疗的新途径。方法:OPN基因被OPN-siRNA沉默后,RT-PCR检测OPNmRNA的表达水平;Western-blot检测OPN蛋白质的表达水平,PI Staining检测凋亡细胞数目,MTT Assay检测凋亡细胞水平;建立人喉鳞癌裸鼠种植瘤模型;裸鼠瘤体内注射治疗结束前后分别称量裸鼠体重、离体肿瘤的重量和测量肿瘤体积大小。结果:OPN基因被OPN-siRNA沉默后,western blot检测Hep-2细胞的OPN基因剪切体1蛋白表达明显减弱;RT-PCR技术检测OPN mRNA表达量明显降低。PI染料染色后,OPN-RNAi组30%-35%的肿瘤细胞凋亡;MTT Assay结果显示,OPN-siRNA慢病毒转染Hep2细胞后,Hep2细胞细胞活力明显下降;肿瘤生长曲线可知,OPN-siRNA慢病毒转染组的肿瘤生长明显受到抑制;OPN-siRNA慢病毒转染组的裸鼠瘤重和体积均明显低于对照组(P<0.05),抑瘤率达65.37%。结论OPN在Hep-2细胞中表达明显上调可能与喉鳞癌发生、发展相关;OPN-siRNA慢病毒在Hep-2细胞中可获得高效转染,并能产生特异性的基因沉默效应;siRNA介导的OPN基因沉默在体外实验中显著抑制了Hep-2细胞的生长,30%-35%的肿瘤细胞凋亡:在体内实验中对裸鼠喉鳞癌皮下种植瘤产生明显的抗瘤效应。
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