猪附红细胞体(Mycoplasma suis,M.suis)能够在猪群中进行传播,产生贫血、黄疸等症状。引起动物机体免疫力下降,生长缓慢导致消瘦,在严重时可以导致动物的死亡,目前市面上还没有能够彻底治疗的药物和预防的疫苗。因此制备MSG1蛋白与核酸疫苗,采用联合免疫与单一免疫的方式进行研究,本实验从以下3个方面开始进行:1.用PCR方法得到MSG1的基因,测序后在NCBI上进行同源性比对,采用生物信息学软件对MSG1基因进行分析。结果显示同源性完全一致,MSG1基因是一个完整的开放阅读框,大小为1011 bp,编码336个氨基酸,没有信号肽与跨膜区,并用密码子优化软件进行密码子优化。2.将目的基因分别与原核表达载体pET-28(b~+)与pVAX1真核表达载体连接,优化蛋白质表达与纯化的条件并制备核酸疫苗。结果显示能够在上清中得到目的蛋白,纯化后验证是目的蛋白,制备的核酸疫苗纯度好。3.对小鼠进行免疫,测定SOD与MDA评价对机体产生的氧化损伤;测定生化指标ALT、AST、CREA、UREA评价对肝肾的损伤性,测定Tbil、Dbil、Glu分析MSG1蛋白与黄疸、贫血的联系;测定IL2评价细胞免疫水平,建立ELISA方法评价体液免疫水平。结果显示不同的免疫方式对机体不产生氧化损伤,不影响肝肾功能,MSG1蛋白与贫血、黄疸没有直接联系。MSG1蛋白免疫能提高体液免疫水平,不能提高细胞免疫水平,核酸疫苗免疫能提高细胞免疫水平,对体液免疫水平的提高很小,联合免疫方式细胞免疫与体液免疫水平都有提高。