胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因在仿刺参再生过程中的表达分析

来源 :辽宁师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:long_teng
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胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶在动物的许多生理过程中起着十分重要的作用,包括创伤修复,炎症反应,凝血反应,再生等功能。本文通过基因克隆(RACE)技术首次获得了仿刺参胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的全长cDNA序列,该序列含有1216bp碱基对,5’端有39bp的非编码区,3’端有355bp的非编码区。通过基因步移的实验手段得到了胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因包括内含子和外显子在内的DNA序列,该序列包括含有4个内含子序列和5个外显子序列。用原位杂交技术来检测胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶在不同组织中的表达,结果显示胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶在体壁,肠,呼吸树等组织中均有分布,其中在肠中的信号最强。用Realtime-PCR技术分别检测胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因在不同组织的不同再生阶段的表达模式。结果显示在再生一小时内的体壁中,胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因呈现出短暂并明显的上调趋势,接着表达量下调,随着组织的再生,胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因表达量上调,最后达到正常水平。在肠和呼吸树中,胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因的表达量随着组织的再生呈现出上升趋势。但是在这些组织中胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因的表达量一直低于正常水平直到再生出新组织表达量恢复到正常水平。胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因在仿刺参不同再生阶段的表达量的变化表明其在再生过程中起着重要的作用。对仿刺参胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶基因在其不同再生过程中表达模式的研究对于阐明仿刺参再生调控通路和相关分子机制的有着重要意义。同时,对于进一步了解仿刺参苗种生产和养殖过程中吐肠的发生和防治及提高苗种成活率有着一定的应用价值。
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