【摘 要】
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该研究在副鸡嗜血杆菌A、C型特异性单克隆抗体的基础上成功地建立了能区分A、C血清型抗体的阻断ELISA（B-ELISA）检测方法,并应用此方法对9种常见病原体阳性血清及多份免疫鸡、人
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该研究在副鸡嗜血杆菌A、C型特异性单克隆抗体的基础上成功地建立了能区分A、C血清型抗体的阻断ELISA（B-ELISA）检测方法,并应用此方法对9种常见病原体阳性血清及多份免疫鸡、人工感染鸡、临床可疑病鸡血清和阴性血清进行了检测,结果证明,该方法不与常见的9种病原体产生交叉反应,对A型抗体的检出率可达到85﹪-100﹪,对C型抗体的检出率也可达到60﹪.在此基础上组装了B-ELISA试剂盒,试剂盒保持了与B-ELISA方法相同的敏感性与特异性,在37℃可保存7天以上,4℃可保存10个月以上,批次之间特异性符合率为100﹪,敏感性符合率为90﹪以上.应用组装的试剂盒对人工感染鸡和免疫鸡血清B-ELISA抗体动态进行了研究,并与血清凝集抗体、血凝抑制抗体的动态变化进行了比较.应用B-ELISA试剂盒对全国大多数地区鸡传染性鼻炎的流行情况进行了调查,检测了来源于10个不同省市的血清1104份,结果A型抗体阳性检出率为13.9﹪,C型抗体的阳性检出率为9.2﹪.根据此流行病学调查结果,进行了相应传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的研制,应用3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了安全性、免疫持续期及保存期检验.该研究还构建了副鸡嗜血杆菌Hp8株的λgt11表达文库,从中筛选出了与外膜蛋白抗体呈现阳性反应的15个重组子,并对其中两个重组子插入片段的序列进行测定,两个片段长度均为2.8KB,是两段新的副鸡嗜血杆菌DNA序列.
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