YJ-8的抗炎及神经保护作用研究

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背景:小胶质细胞是中枢神经系统中最主要的免疫细胞,其过度激活在很多炎症相关中枢神经系统疾病的发生与发展中起重要作用。从中草药中寻找不良反应少、具有显著的中枢抗炎作用及神经保护作用的药物是在炎症相关中枢神经系统疾病治疗的研究中的热点。我们前期的研究发现从传统中药川木香中提取的单体化合物YJ-8能显著抑制干扰素诱导的巨噬细胞产生的一氧化氮。对YJ-8的进一步结构分析表明其是已知化合物泽泻醇(alismol)。本研究在前期发现的基础上进一步研究alismol对小胶质细胞激活的影响及机制,探讨其神经保护的作用。   目的:研究alismol对小胶质细胞激活产生的炎症介质及细胞因子的抑制作用及机制,并进一步探讨alismol对炎症导致的神经元损伤的保护作用。   方法:采用脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激小鼠小胶质细胞BV2细胞建立小胶质细激活的细胞模型。Alismol预处理后采用Griess试剂法测定NO释放量的变化。用Western Blot法和半定量RT-PCR法检测alismol预处理后诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧合酶2(Cyclooxygenase2,COX-2)、细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α以及上游信号通路相关分子的变化。ELISA法检测PGE2和细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达量的变化。用流式细胞术检测胞内活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)生成量的变化。最后,将LPS和alismol共同处理过的BV2细胞条件培养液加入神经元细胞培养体系,检测神经元细胞存活率是否受到影响。   结果:alismol能明显抑制LPS诱导的BV2细胞NO和PGE2的释放,通过部分调节NF-κB和PI3K-Akt通路,抑制炎症介质以及细胞因子的表达,同时明显缓解胞内ROS的产生。alismol能通过减少小胶质细胞激活而有效减少炎症反应引起的神经元损伤,起到一定的神经保护作用。   结论:alismol不但对小胶质细胞激活时产生的炎症介质和细胞因子有显著的抑制作用,还有一定的神经保护作用。可为治疗炎症相关中枢神经系统疾病的药物筛选工作提供有价值的参考。  
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