尿酸酶菌种筛选、提取、发酵优化、分离纯化及性质研究

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本论文主要包括四个方面的内容:产尿酸酶菌种的筛选;发酵条件的优化;提取条件的研究和酶的分离纯化与基本性质研究四部分。主要研究结果如下: (1) 经过筛选,从19株菌株中选取产朊圆酵母2.281作为尿酸酶生产菌种,其产酶活性达到0.85U/ml。 (2) 以产朊圆酵母2.281作为研究对象,对此菌株尿酸酶形成条件进行研究表明:蔗糖和葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源。尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物。另外,也研究了部分金属离子对酶产量的影响。对它的摇瓶液体发酵条件进行优化得到其液体发酵的最佳条件为:以24小时种龄的种子液接种10%液体发酵培养基,在28℃,pH为6.0条件下发酵;培养基的组成为:3%蔗糖,2%蛋白胨,0.5%酵母膏,0.05%尿酸,0.05%KCl。在250ml三角瓶中装50ml培养液,在200r/min的摇床上28℃振荡培养23h,尿酸酶活性达到11U/ml。 (3) 利用超声波与Triton X-100及巯基乙醇结合处理产朊圆酵母2.281,细胞悬浮液在pH8.5条件下,可使产朊圆酵母2.281的尿酸酶快速地释放。研究表明:当pH8.5时,经0.5%(v/v)Triton X-100及0.5%巯基乙醇处理细胞悬浮液2小时,再用超声波处理30分钟,获得的酶活性明显高于单一破碎法处理细胞悬浮液所获得的酶活性:超声
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