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第一部分逍生散治疗肝郁阴虚型干眼的临床研究[目的]通过眼表疾病指数评分、泪膜破裂时间、泪液分泌检查、角膜荧光素钠染色情况、视觉质量检查及中医症状量化评分等多角度评价逍生散颗粒剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液治疗肝郁阴虚型干眼的临床疗效。[方法]纳入符合标准的66例肝郁阴虚型干眼患者,随机分为治疗组和对照组各33例,治疗组予逍生散颗粒剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液,对照组予中药颗粒安慰剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液,均治疗4周。于治疗前、后分别记录两组患者眼表疾病指数评分（Ocular Surface Disease Index,OSDI）、泪膜破裂时间（breakuptime oftearfilm,BUT）、角膜荧光素钠染色（fluorescent,FL）评分、基础泪液分泌试验（Sehirmer I test,SIt）、泪膜客观散射指数（tear film objective scatter index,TF-OSI）、调制传递函数截止频率（Modulation Transfer Function cut off,MTF cutoff）、斯特列尔比值（Strehl Ratio,SR）及中医症状量化评分,并比较两组治疗后的总有效率。[结果]本研究治疗组脱落3例,对照组剔除3例,最终纳入数据分析的患者共60例。本研究纳入的患者中,性别上,男性共21例,女性共39例,其中,治疗组男性10例,女性20例;对照组男性1 1例,女性19例。经x2检验,两组在性别上差异无统计学意义（P＞0.05）。年龄上,治疗组最大79岁,最小25岁,平均（53.33±14.52）岁,对照组最大80岁,最小26岁,平均（54.17±13.10）岁,经t检验,两组在年龄上差异无统计学意义（P＞0.05）。1.OSDI评分比较:治疗后,两组OSDI评分均较治疗前降低,且治疗组（26.448±10.861）分低于对照组（32.253±9.786）分,差异均有统计学意义（P＜0.05）。2.BUT、FL及SIT 比较:治疗后,①治疗组BUT为（7.34±2.55）s、FL为（0.3±0.5）分、SIt 为（12.1±6.0）mm/5min,BUT 和 SIt 均较治疗前提高,FL较治疗前降低,经统计,差异均有统计学意义（P＜0.05）;②对照组BUT为（5.86±2.22）s、FL 为（0.5±0.8）分、SIt 为（9.3±5.3）mm/5min,BUT 和 SIt 均较治疗前提高,FL较治疗前降低,经统计,差异均有统计学意义（P＜0.05）;③治疗后,治疗组和对照组比较,除FL无统计学意义（P＞0.05）外,BUT和SIt均有统计学意义（P＜0.05）。3.视觉质量检查比较:①治疗后两组TF-OSI均较治疗前降低,治疗组治疗后TF-OSI（0.321±0.147）低于对照组治疗后TF-OSI（0.511±0.223）,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。②治疗后两组MTF cutoff和SR均较治疗前提高,治疗组治疗后MTF cut off（35.543±12.436）c/deg高于对照组治疗后MTF cut off（31.172±11.685）c/deg,治疗组治疗后SR（0.222±0.096）高于对照组治疗后SR（0.185±0.068）,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。4.中医症状量化评分及有效率比较:治疗后中医症状量化评分比较,治疗组（9.4±3.6）分,对照组（12.7±4.0）分,两组组内和组间比较,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。经治疗,治疗组的总有效率（90%）高于对照组（73.3%）,差异具有统计学意义（P＜0.05）。[结论]逍生散颗粒剂可以延长泪膜破裂时间,增加泪液分泌量,减轻角膜损伤情况,改善视觉相关功能,减轻周围环境对眼部的刺激。逍生散颗粒剂治疗肝郁阴虚型干眼患者安全有效,能改善患者眼表及全身不适症状,减轻患者痛苦,提高生活质量。第二部分干眼患者泪液蛋白质组学的差异表达研究[目的]通过质谱技术对干眼患者与健康对照者泪液差异蛋白进行分析,探讨干眼疾病相关通路,为后续机制研究提供参考。[方法]运用4D非标记（Label-free）定量蛋白质组学技术,对干眼患者与健康对照者泪液中差异蛋白进行分析。采用Schirmer泪液滤纸条（无表面麻醉下）收集受试者泪液标本,并于-80℃冰箱保存待检。对泪液样本进行蛋白质提取、肽段酶解、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）数据采集、MaxQuant软件对蛋白质进行鉴定及定量分析。[结果]本研究鉴定到蛋白数共1588个,其中可定量蛋白数为1427个,干眼组患者与健康对照组相比,共有102个差异蛋白,显著上调的蛋白共56个,显著下调的蛋白共46个。通过Cytoscape（版本号:3.8.2）软件得到23个核心蛋白。对差异蛋白进行亚细胞定位,发现,干眼的发生与泪液中那些在细胞质、细胞外、细胞核等细胞器中发挥作用的蛋白表达异常有关。GO功能富集分析发现,差异蛋白主要参与了中性粒细胞脱颗粒、细胞蛋白质代谢等生物学过程,酶结合、蛋白酶结合及蛋白质结合等分子功能。KEGG通路分析发现,P-value≤0.05的Pathway共计22条,FDR≤0.05的Pathway共计8条,差异蛋白主要集中在溶酶体、抗原加工及提呈以及糖类等代谢通路。[结论]4D-Label-free定量蛋白质组学技术可用于对泪液蛋白进行检测,利用生物信息学技术对差异蛋白进行相关分析,初步筛选出与干眼有关的蛋白,这些蛋白参与溶酶体损伤、抗原加工及提呈、细胞物质代谢等生物学过程,为干眼潜在发病机制研究提供一定思路。第三部分逍生散治疗肝郁阴虚型干眼患者的泪液蛋白质组学研究[目的]基于前期研究,采用4D-Label-free蛋白质定量技术检测逍生散颗粒剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液治疗前、后干眼患者泪液蛋白质,找出差异蛋白,并进行初步分析,为深入研究其治疗干眼的作用机理提供理论参考依据。[方法]运用4D-Label-free蛋白质定量技术,对干眼患者治疗前及治疗后泪液中差异蛋白进行分析。采用Schirmer泪液滤纸条（无表面麻醉下）收集受试者泪液标本,并于-80℃冰箱保存待检。对泪液样本进行蛋白质提取、肽段酶解、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）数据采集、MaxQuant软件对蛋白质进行鉴定及定量分析。[结果]本研究鉴定到蛋白数共1585个,其中可定量蛋白数为1424个,干眼患者治疗前后相比,泪液中共有15个差异蛋白,显著上调的蛋白共11个,显著下调的蛋白共4个。对差异蛋白进行亚细胞定位,发现,逍生散颗粒剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液治疗干眼的作用机制可能与调节泪液中那些在细胞质、内质网等细胞器中发挥作用的蛋白表达有关。GO功能富集分析发现,差异蛋白主要参与了内质网应激反应（response to endoplasmic reticulum stress,RES）、内质网蛋白质折叠、细胞氧化还原稳态等生物学过程。KEGG通路分析发现,P-value≤0.05的Pathway共计6条,FDR≤0.05的pathway共计4条,差异蛋白主要集中在内质网蛋白质加工、内吞作用、抗原加工及提呈、甲状腺激素合成通路上,这些通路上主要富集 HSPA5、HSP90B1、PDIA3、P4HB、TSG101、EHD1、RAB7A 和RAB11B八种蛋白,且均显示相对高表达,主要参与抑制细胞凋亡、细胞稳态、免疫应答、激素调节等重要生物学过程。[结论]逍生散颗粒剂联合0.3%玻璃酸钠滴眼液具有抗细胞凋亡、激发机体免疫应答以及调节甲状腺激素分泌,改善细胞代谢,维持细胞稳态的作用,其作用机制可能与调控 HSPA5、HSP90B1、PDIA3、P4HB、TSG101、EHD1、RAB7A和RAB11B八种蛋白表达有关,为进一步实验验证并深入研究逍生散治疗干眼的作用机制提供理论依据。