罗汉果是我国的传统植物,可药食两用。罗汉果含有天然甜味剂——罗汉果皂苷,由于其甜度高、热量低、口感纯正、无毒副作用,是糖尿病患者最适宜的甜味剂之一,罗汉果皂苷的应用日益广泛,已成为许多食品和营养品的原料。20世纪80年代初,一种高甜度的皂苷首次从罗汉果干果中分离出来,命名为罗汉果苷V(Mogroside V)。研究表明,它是一种优良的天然甜味剂,其含量约为1%,甜度相当于蔗糖甜度的300倍,是主要的甜味成分。同时罗汉果苷Ⅴ又是罗汉果皂苷的主要成分,所以其含量是评价罗汉果糖苷产品质量的重要指标。目前,市场上的罗汉果甜味剂主要是罗汉果皂苷提取物,高纯度苷Ⅴ产品很少,且价格昂贵。这主要是由于目前罗汉果苷Ⅴ的分离纯化技术不是很成熟,方法不是很完善,因此本论文试图建立一种罗汉果苷Ⅴ的高效分离纯化技术。本论文以罗汉果干果为研究对象,建立了罗汉果苷Ⅴ的高效液相色谱检测方法,对罗汉果不同部位的苷Ⅴ含量进行了测定,并且对罗汉果苷Ⅴ最佳提取工艺进行了深入系统的研究,确定最佳提取工艺参数,同时摸索了罗汉果苷Ⅴ的大孔树脂和硅胶柱层析纯化工艺,为实际生产建立良好的工作基础。主要研究结果如下：1.建立HPLC定量检测罗汉果苷Ⅴ的方法。HPLC色谱条件为：色谱柱为Hypersil ODS (250 mm×4.6 mm,5μm),柱温35℃,检测波长为203mn,流动相为乙腈：水(23：77,v/v),进样量20μL,流速0.8 mL/min。2.利用HPLC测定罗汉果不同部位苷V的含量。实验结果表明：罗汉果各部位均含有罗汉果苷V,其中果实的含量最高,为0.22%；根的含量最低,为0.02%。3.摸索罗汉果苷V的最佳提取工艺条件。采用乙醇加热回流法提取,分别通过单因素和正交试验,确定了最佳提取工艺参数：乙醇浓度50%,料液比1：20,提取温度70℃,提取时间120 min。在此提取条件下,重复提取2次,罗汉果苷V的提取率达到72%。研究结果还表明,影响罗汉果苷V提取的最主要因素为乙醇浓度,其次为料液比和温度,而时间对提取的影响并不显著。4.优化罗汉果苷V的纯化工艺。通过比较D101、D201、HPD400、HPD100、NKA-1、AB-8六种大孔树脂对罗汉果苷V的吸附性能,选用AB-8作为初步纯化的树脂,乙醇为洗脱剂,摸索出的最佳洗脱条件为：上样液pH=9.0,浓度0.4mg/mL,流速为2 BV/h,依次用去离子水、25%乙醇、60%乙醇洗脱,洗脱液总用量为7 BV,收集60%乙醇洗脱液。经HPLC检测,罗汉果苷V纯度达到52.2%,得率为61%。利用硅胶柱层析进一步纯化罗汉果苷V粗产品,最后纯度达到89.6%,得率为62.3%,获得了较纯的产品。