乳源免疫调节肽体外抑制人卵巢癌细胞侵袭和转移

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yelangqishi
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目的:探讨乳源免疫调节肽(PGPIPN)对人卵巢癌细胞侵袭和转移的影响,探讨PGPIPN抑制卵巢癌细胞侵袭和转移的可能分子机制。  方法:Transwell小室测定其侵袭力和迁移力,细胞划痕实验测定细胞运动能力,细胞克隆形成实验观察细胞的克隆形成能力,MTT法比较PGPIPN对细胞株SKOV3、人正常肝细胞株LO2、小鼠永生化成纤维细胞株(MEFS)、原代卵巢癌细胞、原代乳腺癌细胞和原代卵巢癌旁组织细胞的生长抑制情况,检测PGPIPN的细胞毒性,PCR和westernblot检测MTA1与NM23H1基因的mRNA和蛋白质的表达情况。  结果:Transwell试验中,与空白对照组相比,浓度为1μg·ml-1和10μg·ml-1的PGPIPN明显抑制了卵巢癌细胞的侵袭和转移(p<0.01),抑制率细胞株SKOV3分别为20.20%和23.78%,原代卵巢癌细胞为23.56%和27.11%;划痕实验显示对细胞株的运动能力得到了明显的抑制(p<0.01),PGPIPN浓度为10μg·ml-1时,细胞株SKOV3的24h抑制率为56.24%;平板法的克隆形成实验结果较明显,与空白对照组相比1μg·ml-1和10μg·ml-1的PGPIPN抑制率分别为32.50%和38.11%;MTT实验中,PGPIPN浓度为10μg·ml-1时,细胞株SKOV3的72h抑制率为32.36%,而LO2和MEFS的抑制率较低,均无统计学意义(p>0.05),与此同时,顺铂对其三种细胞均有较强的抑制作用(p<0.01)。PCR实验中显示,PGPIPN可以显著降低细胞株SKOV3的MTA1基因的表达(p<0.01),当浓度为10μg·ml-1时,MTA1基因的mRNA降低率最大,为23.11%,同样,在卵巢癌原代细胞中有相似的结果,浓度为10μg·ml-1时的降低率为25.72%;PGPIPN可以显著增强细胞株SKOV3的NM23H1基因的表达(p<0.01),当浓度为10μg·ml-1时,NM23H1基因的mRNA增长率最大,为24.89%,同样,在卵巢癌原代细胞中有相似的结果,浓度为10μg·ml-1时的增长率为25.91%。westernblot试验中显示,PGPIPN可以显著降低MTA1蛋白的表达(p<0.01),当浓度为10μg·ml-1时,降低率最大,细胞株SKOV3为22.39%,原代细胞为24.08%。  结论:1、PGPIPN能够抑制人卵巢癌细胞的侵袭和转移,对正常细胞无细胞毒性作用;2、PGPIPN通过下调MTA1与上调NM23H1基因的mRNA和蛋白质的表达来调控卵巢癌细胞的侵袭和转移。
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