hFLVCR对红系造血调控的研究

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人类猫白血病C亚类病毒受体(Human Feline Leukemia Virus Receptor,hFLVCR)广泛表达于CD34+造血干/祖细胞、血液细胞及其他人类组织和细胞系(如K562等)。最新研究发现hFLVCR有输出血红素(heme)的重要功能,从而可能在红系的早期分化过程中起重要作用,因此引起人们的关注。目前hFLVCR对于红系造血的作用和机制尚未完全阐明。有关FLVCR的功能和病理生理意义的研究在国外尚处于起步阶段,国内更无报道,故这是一个有待深入探讨的领域。 目的:1.体外动态观察氯高铁血红素(Hemin,Hm)诱导K562细胞向红系分化过程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表达,以明确hFLVCR与红系造血之间的关系。2.将hFLVCR反义寡核苷酸转染K562细胞,封闭的含量及K562细胞的凋亡状况,旨在探讨hFLVCR对红系造血的影响hFLVCR的功能。通过细胞化学染色、免疫组化和流式细胞术等,观察K562细胞向红系分化情况、细胞内脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)和机制。 方法:1.用MTT法观察诱导剂Hm对K562细胞增殖的影响。2.采用流式细胞术和实时荧光定量PCR技术,动态观察氯高铁血红素诱导K562细胞向红系分化过程中hFLVCR的蛋白和mRNA的表达。3..用免疫组化法观察转染hFLVCR反义寡核苷酸,阻断hFLVCR的表达后,K562
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