聚乙二醇修饰对精氨酸激酶抗原性影响的研究

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近年来,过敏性疾病在全球的发病率急剧上升,对人类健康的威胁也日益增大,其中食物过敏尤为常见。而导致人类过敏的食物中,虾蟹等甲壳类动物及其制品是非常重要的一类。精氨酸激酶(arginine kinase,AK)是无脊椎动物体内调节能量代谢最重要的酶,被证实为甲壳类动物的主要过敏原之一。本研究从刀额新对虾中纯化出精氨酸激酶,在不同反应pH值、反应时间和反应摩尔质量比等条件下以单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯(SC-mPEG)对额新对虾精氨酸激酶进行化学修饰。用三硝基苯磺酸(TNBS)法测定修饰产物的平均修饰率,同时利用间接竞争 ELISA检测修饰产物的抗原性。结果显示,不同反应条件下,修饰产物的平均修饰度与抗原性降低率相关系数均为0.99以上,说明修饰产物的平均修饰度与抗原性降低率有较高的正相关关系,随着平均修饰度的增高,抗原性降低率也随之增高,当反应 pH为7.5,反应时间为4h,AK与SC-mPEG摩尔质量比为1:3时,AK平均修饰度可达到38.31%,抗原性降低率为78.8%,表明聚乙二醇修饰能使AK抗原性降低,其中反应时间和反应物质的量比是影响SC-mPEG修饰AK后抗原性降低的主要因素。本研究对开发有效且可行的降低精氨酸激酶抗原性的方法提供实验依据。
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