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研究目的本实验以寒凝证类痛经模型大鼠为研究对象,不同时机介入艾灸模型大鼠三阴交穴,分别是A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)。观察比较不同介入时机艾灸三阴交穴对寒凝证类痛经模型大鼠子宫收缩强度的影响,并检测缩宫素受体(oxytocin receptor, OTR)、加压素受体(vasopressin receptor, VPR),探讨艾灸不同介入时机对缓解胞宫疼痛的部分干预机制。研究方法实验选用动情间期SD雌性大鼠64只,按照随机分组分为盐水组、寒凝证类痛经组、A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组),每组16只。除盐水组外,其余各组大鼠均连续10d给予皮下注射苯甲酸雌二醇注射液,第1、10d皮下给药0.5mg/只,余日均为0.2mg/只。末次给药1h后,腹腔注射缩宫素2U/只,第1-5d每日在给药后放入-25℃冰柜冷冻4h,中途在2h打开冰柜换气5s。盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。A组(造模后介入组)于第10日注射缩宫素后,灸一次,连灸3壮(即痛经模型成功建立后施灸)。B组(造模中介入组)分别于造模中的第6天,第8天,第10天给药后,各灸一次,共三次,每次连灸3壮(第6、第8、第10天施灸)。运用BL-420E+生物机能实验系统检测在体大鼠子宫收缩强度。采用RT-PCR方法检测大鼠子宫组织中缩宫素受体(OTR)和加压素受体(VPR) mRNA的表达。研究结果1不同时机介入艾灸对寒凝证类痛经模型大鼠子宫收缩强度的影响与盐水组相比,模型组大鼠子宫收缩波个数、峰峰值及活动度均明显增加或增强,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)子宫收缩波个数显著减少、子宫活动度明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);A组(造模后介入组)与B组(造模中介入组)比较,子宫收缩波个数、峰峰值及活动度的差异均无统计学意义(P>0.05)。2不同时机介入艾灸对寒凝证类痛经模型大鼠子宫组织中OTR、VPR mRNA表达的影响(1) OTR mRNA的表达:与盐水组比较,模型组OTR mRNA表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)OTRmRNA表达均明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);A组(造模后介入组)与B组(造模中介入组)OTR mRNA表达的比较,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)VPR mRNA的表达:与盐水组比较,模型组VPR mRNA表达增强,但无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,A组(造模后介入组)和B组(造模中介入组)VPR mRNA表达均明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);A组(造模后介入组)与B组(造模中介入组)VPR mRNA表达的比较,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。研究结论1寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度明显增强,寒凝证模型结合类痛经模型的造模方法制备寒凝证类痛经大鼠模型稳定。2早期介入艾灸和单纯即刻艾灸三阴交均能明显降低寒凝证类痛经大鼠子宫收缩强度,缓解疼痛状态。推测艾灸部分镇痛机制可能是通过抑制子宫组织中OTR、VPR mRNA的异常表达,进而缓解子宫平滑肌异常的痉挛性收缩状态。3艾灸防治结合与单纯治疗对寒凝证类痛经大鼠的镇痛效应未见明显差异。综上所述,原发性痛经模型子宫OTR、VPR mRNA的表达水平失衡。艾灸镇痛效应的部分机制是通过调节机体子宫OTR、VPR mRNA的异常表达,艾灸不同介入时机均能达到缓解疼痛的目的,但不同介入时机的镇痛效应未见明显差异。