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目的：本研究利用前期构建的地面对照和太空诱变宫颈癌CaSki细胞株消减文库,筛选在地面对照和太空诱变宫颈癌CaSki细胞中差异表达的基因,并对其功能进行研究。方法：利用消减杂交文库制备反向Northern杂交膜,对48A9CaSki细胞和对照CaSki细胞进行同位素探针标记,而后反向Northern杂交,通过放射性自显影筛选差异性表达基因。通过RNAi方法和构建真核表达载体方法,分别抑制和增加差异性表达基因的表达,利用MTT、流式细胞术、裸鼠成瘤等实验检测CaSki细胞生物学性状的变化,进而检测细胞对抗肿瘤药物的敏感性,用RT-PCR和Western blot检验此基因作用机制。结果：1.我们筛选到33个差异表达基因,涉及细胞骨架、细胞分化凋亡、基因转录等。我们利用太空这一特殊环境得到了和肿瘤发生发展相关的基因,为研究肿瘤发生发展的机制奠定了基础。其中STC1基因是我们比较感兴趣的一个差异表达基因。2.STC1基因在宫颈癌组织中的表达弱于正常组织。MTT实验检测发现,STC1基因沉默组(CaSki/siSTC1)细胞生长速度比阴性对照组(CaSki/siNC)细胞的生长速度明显加快,集落形成实验表明集落形成率明显上升,流式细胞分析显示基因沉默组细胞G1期细胞减少,细胞迁移侵袭实验表明STC1表达减少后,CaSki细胞的侵袭迁移能力均上升。裸鼠成瘤实验表明沉默组细胞成瘤能力增强,这些表明STC1基因可能抑制CaSki细胞的生长、转移,诱导细胞凋亡。3.在CaSki细胞转染STC1真核表达载体后,MTT实验检测发现,STC1基因转染组(CaSki/STC1)细胞生长速度比阴性空载体转染对照组(CaSki/NC)细胞的生长速度明显减慢,集落形成实验表明集落形成率明显下降。流式细胞分析显示基因转染组细胞G1期细胞增加。细胞迁移侵袭实验表明STC1表达增加后,CaSki细胞的侵袭迁移能力均下降。裸鼠成瘤实验表明STC1基因转染组成瘤能力下降。以上观测表明,STC1基因转染CaSki细胞后抑制了CaSki细胞的生长、转移,诱导了细胞的凋亡。所以STC1基因转染有可能用于肿瘤的治疗。4.顺铂、毒胡萝卜素和雷帕霉素均抑制了CaSki细胞的增殖,诱导了细胞凋亡,当CaSki细胞增加STC1基因含量时,顺铂、毒胡萝卜素和雷帕霉素对细胞的抑制增强,凋亡细胞增加,这些表明STC1基因增强了CaSki细胞对顺铂、毒胡萝卜素和雷帕霉素药物的敏感性,为肿瘤的治疗提供了新的途径。5.无论在mRNA水平还是蛋白水平,当CaSki细胞内STC1表达水平下降时(RNAi),NF-κB水平随之下降；当STC1表达水平上升时(真核转染STC1-pcDNA3.1 (+)), NK-κB表达水平也随之上升,表明STC1与NF-κB在表达水平上呈正相关。当用顺铂(2μg/ml)或毒胡萝卜素(3μM)刺激CaSki和HeLa细胞时,Caspase-3 mRNA表达量逐渐增加,而STC1与NF-κB也呈现表达上升趋势,且呈正比。染色质免疫共沉淀实验发现,NF-κB可在细胞内与STC1的启动子发生结合。这些结果表明,核转录因子NF-κB在宫颈癌细胞中和STC1基因启动子结合启动了STC1的表达,从而诱导了宫颈癌细胞的凋亡。结论：通过构建抑制性消减杂交文库结合反向Northern dot blot筛选差异性表达基因的方法,是一种高通量高效率的筛选方法。STC1在宫颈癌细胞的表达可抑制细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,并且通过核转录因子NF-κB的启动发挥作用。这为进一步探讨肿瘤的发生发展机制奠定了基础,并有可能成为临床治疗肿瘤的一条新途径。