丹参冠瘿组织悬浮培养生产丹参酮动力学与合成调控

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丹参冠瘿组织具有生长快、激素自主、丹参酮含量高等特点,该论文研究了丹参冠瘿组织悬浮培养的动力学规律及丹参酮合成调控,并初步探讨了培养-分离耦合过程与丹参酮连续化生产工艺.建立了丹参冠瘿组织悬浮培养系,其由淡黄色、近圆形、尺寸为5-10mm的颗粒组成,培养液纯清;通过考察基本培养基、大量元素(C、N、Ca等)对细胞生长和丹参酮积累的影响,得出了适宜的培养基组成为MS,初始糖浓度为3%.系统研究了丹参冠瘿组织悬浮培养的动力学规律,结果表明:丹参冠瘿组织生长周期约为20-25天,3-7天近似为指数生长期,比生长速率为0.16d<-1>,7-13天近似为恒速生长期,生长速率为0.69g/(L.d);13-21天为减速生长期.第21天达最大生物量10.9mg/L,丹参酮积累量为8.4mg/L.并建立了丹参冠瘿组织生长、底物消耗和产物积累的分相动力学模型,模型计算结果与实验值吻合较好.研究了3种真菌及酵母诱导物的加入对丹参酮生物合成的调控作用,结果表明,以酵母诱导物效果最好,在接种后12天加入酵母诱导物使其在培养中的浓度为30mgS/L可使丹参酮的积累量达到65.9mg/L,为对照的7.8倍.另外,对诱导物的调控机理做了初步探讨.
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