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转基因耐草甘膦大豆是种植规模最大的的转基因耐除草剂作物,2013年种植面积达到8450万公顷,占转基因种植总面积的48.3%。本研究以耐草甘膦大豆06-698及MON87701RR2Y为研究材料,在室内和田间条件下,针对耐草甘膦大豆对靶标除草剂草甘膦的耐受性测定方法进行了研究。测定方法包括:生物测定法、莽草酸含量测定法和EPSPS蛋白测定法。主要研究结果如下:1.在网室盆栽条件下,以整株植物测定的方法检测了耐草甘膦大豆06-698和MON87701RR2Y,对照大豆A5547和中黄13对草甘膦的耐受性。试验结果表明大豆A5547和中黄13对草甘膦非常敏感,草甘膦处理后7天,植株就表现出药害症状,处理后28天,植株整株死亡。耐草甘膦大豆06-698和MON87701RR2Y对草甘膦表现出较强耐受性,草甘膦剂量615~3690g a i/hm2处理后,该材料株高、鲜重与空白对照相比差异不显著。4920g a i/hm2剂量处理后,株高与对照相比差异不显著,但MON87701RR2Y鲜重与空白对照相比差异显著,抑制率为17.85%,表明高剂量草甘膦可能影响大豆生长。2.采用室内试验和田间试验相结合的方法,测定了大豆不同叶龄喷施草甘膦处理后莽草酸的积累量。试验结果表明:1230.0~2460.0g a i/hm2草甘膦处理后,常规大豆材料叶片莽草酸含量急剧上升,并随草甘膦处理剂量的提高而增加。耐草甘膦大豆与不用药空白对照相比,叶片莽草酸含量无显著差异,在4920.0g aI/hm2草甘膦处理后,体内莽草酸出现短时间的积累,但5~9天后恢复至药前水平。耐草甘膦大豆在3片、5片、7片羽状三出复叶期喷施草甘膦后11天,不同叶龄之间,大豆叶片莽草酸积累量差异不显著,说明上述三个叶龄处理,耐草甘膦大豆材料均表现较好的耐受性。测产结果表明,上述草甘膦处理剂量及处理时期施药后,耐草甘膦大豆籽粒产量与人工除草空白对照差异不显著。3.采用蛋白检测ELASA试剂盒,测定了大豆不同叶龄喷施草甘膦处理后,叶片CP4-EPSPS蛋白表达量的变化。试验结果表明常规大豆A5547草甘膦处理后未检测出CP4-EPSPS蛋白表达,耐草甘膦大豆MON87701RR2Y草甘膦处理后,叶片CP4-EPSPS蛋白表达量稍有升高,各处理剂量间蛋白表达量无显著差异,并且处理后9天叶片CP4-EPSPS蛋白表达量恢复至施药前水平。耐草甘膦大豆MON87701RR2Y不同时期EPSPS蛋白表达量略有差异,表现为5叶期的蛋白表达量高于7叶期的蛋白表达量。