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目的:通过给小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)建立睾丸损伤模型,探讨五子衍宗方对环磷酰胺造成的睾丸损伤的保护作用,并研究其作用机制。 方法:将雄性 Babl/C小鼠随机分为正常对照组、模型组、五子衍宗方低、中、高剂量组。五子衍宗方低剂量(100 mg/kg),五子衍宗方中剂量组(200 mg/kg),五子衍宗方高剂量组(400 mg/kg)预给药三天之后,除正常对照组之外,其余各组腹腔注射CTX200 mg/kg,每周一次,连续四次,同时五子衍宗方低、中、高剂量组继续给药,末次给予CTX后禁食12 h处死小鼠。检测小鼠的体重,睾丸重量,睾丸指数,精子计数,精子活力,HE染色检测睾丸的组织病理学变化,ElISA检测血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量,单细胞凝胶电泳技术检测睾丸生精细胞的DNA损伤,流式细胞术检测精原干细胞数量,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)的染色方法检测生精细胞凋亡,Western blot检测睾丸组织中P53、p-P53、Bcl-2、Bax、Casepase-3蛋白表达。 结果:五子衍宗方能够升高CTX所致小鼠的体重、睾丸重量、睾丸指数下降;改善精子数目和精子活力;HE染色发现五子衍宗方组改善睾丸内曲细精管生精功能,提高各级生精细胞数量;五子衍宗方可以提高机体的抗DNA损伤能力,体现在降低血清中8-OHdG的含量,降低小鼠睾丸中的Olive尾矩、尾距、尾长和尾部DNA含量(P<0.05或P<0.01),降低P53和p-P53的蛋白表达;流式细胞术显示五子衍宗方可升高精原干细胞数量;TUNEL方法显示五子衍宗方可减少睾丸内生精细胞凋亡;同时五子衍宗方可升高Bcl-2蛋白水平,而降低Bax蛋白水平,使Bcl-2与Bax的比值升高,并且降低Casepase-3蛋白的表达,表明其可能通过调控Bcl-2蛋白家族进而影响Casepase-3的表达而较少环磷酰胺导致的生精细胞凋亡。 结论:五子衍宗方能够减轻由 CTX引起的的 DNA损伤导致的小鼠生精细胞凋亡,其机制可能与五子衍宗方提高机体的抵抗 CTX的烷化作用所致的 DNA损伤及促进机体生精功能恢复有关。